CAJ | 학술논문

为了获得一种优良的抗体纯化介质,制备了重组金黄色葡萄球菌蛋白A( rProtein A)亲和填料,并考察了所制备的亲和填料的纯化性能.利用自行构建的rProtein A工程菌,经诱导表达、纯化获得rProtein A纯品,将其偶联到经环氧氯丙烷活化的Sepharose 4 Fast Flow凝胶上,得到rProtein A亲和填料,并使用兔抗尿酸氧化酶抗体对该填料的性能进行验证.结果显示,在自制的rProtein A亲和填料上rProteinA浓度为1.5×10-4 mol/L.采用Scatchard模型分析,得到其解离常数和最大表观吸附量分别为2.28×10-7 mol/L和20.697 g/L,说明制得的rProtein A亲和填料对抗体有很好的结合能力.将该填料于0.1 mol/L NaOH溶液中浸泡1h,其色谱性能未见变化.将该填料用于纯化兔抗体,湿胶结合抗体量可达19 mg/mL；一步柱色谱即可得到电泳纯度的抗体样品,回收率高于96％.本研究为rProteinA亲和填料的国产化奠定了基础.
위료획득일충우량적항체순화개질,제비료중조금황색포도구균단백A( rProtein A)친화전료,병고찰료소제비적친화전료적순화성능.이용자행구건적rProtein A공정균,경유도표체、순화획득rProtein A순품,장기우련도경배양록병완활화적Sepharose 4 Fast Flow응효상,득도rProtein A친화전료,병사용토항뇨산양화매항체대해전료적성능진행험증.결과현시,재자제적rProtein A친화전료상rProteinA농도위1.5×10-4 mol/L.채용Scatchard모형분석,득도기해리상수화최대표관흡부량분별위2.28×10-7 mol/L화20.697 g/L,설명제득적rProtein A친화전료대항체유흔호적결합능력.장해전료우0.1 mol/L NaOH용액중침포1h,기색보성능미견변화.장해전료용우순화토항체,습효결합항체량가체19 mg/mL；일보주색보즉가득도전영순도적항체양품,회수솔고우96％.본연구위rProteinA친화전료적국산화전정료기출.