中国油料作物学报
中國油料作物學報
중국유료작물학보
CHINESE JOURNAL OF OIL CROP SCIENCES
2012年
2期
152-156
,共5页
姚涓%潘志文%陈伟庭%周峰%穆虹%姜大刚%梅曼彤
姚涓%潘誌文%陳偉庭%週峰%穆虹%薑大剛%梅曼彤
요연%반지문%진위정%주봉%목홍%강대강%매만동
转基因大豆%TAIL - PCR%事件特异性检测%定量PCR
轉基因大豆%TAIL - PCR%事件特異性檢測%定量PCR
전기인대두%TAIL - PCR%사건특이성검측%정량PCR
华南农业大学根系生物学研究中心采用拟南芥的紫色酸性磷酸酶基因AtPAP15转化大豆品系粤春03-3(YC03 -3),获得了酸性磷酸酶活性明显提高、可高效利用上壤磷素的转基因大豆新品系AP15 -1.本研究以AP15 -1为研究对象,应用TAIL - PCR技术,根据载体序列设计特异引物,获得了转化载体左侧插入的旁邻序列.设计事件特异性检测引物,进行PCR扩增,只能在AP15 -1的样品中扩增出特异性条带,进一步用实时荧光定量PCR作分析,结果显示,该引物对重复性好,融解曲线显示只有一个特异峰值.本实验应用该引物对建立的检测方法,检测的灵敏度可以达到0.01％,实时荧光定量PCR检测的极限值可以达到9个基因组的拷贝数,能够满足对转基因大豆新品系AP15 -1及其衍生品种检测的需要.
華南農業大學根繫生物學研究中心採用擬南芥的紫色痠性燐痠酶基因AtPAP15轉化大豆品繫粵春03-3(YC03 -3),穫得瞭痠性燐痠酶活性明顯提高、可高效利用上壤燐素的轉基因大豆新品繫AP15 -1.本研究以AP15 -1為研究對象,應用TAIL - PCR技術,根據載體序列設計特異引物,穫得瞭轉化載體左側插入的徬鄰序列.設計事件特異性檢測引物,進行PCR擴增,隻能在AP15 -1的樣品中擴增齣特異性條帶,進一步用實時熒光定量PCR作分析,結果顯示,該引物對重複性好,融解麯線顯示隻有一箇特異峰值.本實驗應用該引物對建立的檢測方法,檢測的靈敏度可以達到0.01％,實時熒光定量PCR檢測的極限值可以達到9箇基因組的拷貝數,能夠滿足對轉基因大豆新品繫AP15 -1及其衍生品種檢測的需要.
화남농업대학근계생물학연구중심채용의남개적자색산성린산매기인AtPAP15전화대두품계월춘03-3(YC03 -3),획득료산성린산매활성명현제고、가고효이용상양린소적전기인대두신품계AP15 -1.본연구이AP15 -1위연구대상,응용TAIL - PCR기술,근거재체서렬설계특이인물,획득료전화재체좌측삽입적방린서렬.설계사건특이성검측인물,진행PCR확증,지능재AP15 -1적양품중확증출특이성조대,진일보용실시형광정량PCR작분석,결과현시,해인물대중복성호,융해곡선현시지유일개특이봉치.본실험응용해인물대건립적검측방법,검측적령민도가이체도0.01％,실시형광정량PCR검측적겁한치가이체도9개기인조적고패수,능구만족대전기인대두신품계AP15 -1급기연생품충검측적수요.
