AD-004蛋白表达、抗体制备及其在睾丸和肾上腺组织中的表达分析
AD-004단백표체、항체제비급기재고환화신상선조직중적표체분석
Protein expression and preparation of polyclonal antibody of AD-004 and study on its expression in the adrenal and testis
  • 万方数据
    中华内分泌代谢杂志 중화내분비대사잡지
    CHINESE JOURNAL OF ENDOCRINOLOGY AND METABOLISM
    2006年 4期 367-371 ,共5页

    乔洁%郑翠霞%陈霞%李雪松%李圣贤%马勤耘%赵双霞%袁国跃%陈名道

    교길%정취하%진하%리설송%리골현%마근운%조쌍하%원국약%진명도

    AD-004蛋白%原核表达%腺苷酸激酶%抗体,多克隆 AD-004蛋白%原覈錶達%腺苷痠激酶%抗體,多剋隆
    AD-004단백%원핵표체%선감산격매%항체,다극륭
    目的 以原核表达的小鼠肾上腺蛋白AD-004为免疫原,制备抗AD-004的兔多克隆抗体,并明确其在肾上腺、睾丸组织中的分布.方法 将小鼠AD-004 cDNA克隆于原核表达载体PET28,经IPTG诱导AD-004的表达.用Ni2+-NTA纯化后的蛋白为免疫原制备抗AD-004多克隆抗体.通过Western印迹鉴定抗体特异性及效价,并用此抗体对小鼠睾丸、肾上腺组织进行免疫组织化学分析.结果 此原核表达系统可高效表达AD-004蛋白,Western印迹结果显示所制备的抗体具有很高的效价和特异性,免疫组化提示AD-004蛋白在肾上腺的髓质表达较高,而在睾丸中主要表达于间质的Leydig细胞.结论 本研究获得了小鼠AD-004原核表达蛋白,成功制备了AD-004多克隆抗体,并发现其在睾丸间质Leydig细胞表达最高,提示AD-004可能在睾丸性激素的合成过程中起重要作用.
    목적 이원핵표체적소서신상선단백AD-004위면역원,제비항AD-004적토다극륭항체,병명학기재신상선、고환조직중적분포.방법 장소서AD-004 cDNA극륭우원핵표체재체PET28,경IPTG유도AD-004적표체.용Ni2+-NTA순화후적단백위면역원제비항AD-004다극륭항체.통과Western인적감정항체특이성급효개,병용차항체대소서고환、신상선조직진행면역조직화학분석.결과 차원핵표체계통가고효표체AD-004단백,Western인적결과현시소제비적항체구유흔고적효개화특이성,면역조화제시AD-004단백재신상선적수질표체교고,이재고환중주요표체우간질적Leydig세포.결론 본연구획득료소서AD-004원핵표체단백,성공제비료AD-004다극륭항체,병발현기재고환간질Leydig세포표체최고,제시AD-004가능재고환성격소적합성과정중기중요작용.
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