CAJ | 학술논문

[目的]以伪狂犬病病毒为载体,构建表达猪2型圆环病毒ORF2基因的重组病毒,并研究其生物学特性.[方法]将猪2型圆环病毒ORF2基因插入到伪狂犬病病毒gG缺失通用转移载体中,构建猪2型圆环病毒-伪狂犬病病毒重组中间转移质粒,然后将该质粒与伪狂犬病病毒TK-/gG-/LacZ+基因组共转染IBRS-2细胞,待发生细胞病变后收集病毒液进行重组病毒的筛选及生物学特性测定.[结果]利用检测PCV2 ORF2基因和LacZ基因的PCR方法筛选到重组病毒TK-/gG-/ORF2+,同时用Southern blotting证实外源基因PCV2 ORF2已成功插入到TK-/gG-/LacZ+亲本株的基因组中.间接免疫荧光试验(IFA)和Western blotting结果显示重组病毒中PCV2 ORF2基因获得了成功表达.对重组病毒的生物学特性研究表明,重组病毒与其亲本株在不同细胞上的增殖滴度相当,且重组病毒对小鼠无致病性,免疫小鼠后可诱导机体产生抗ORF2蛋白的特异性抗体.[结论]重组伪狂犬病毒构建成功,且表达的ORF2蛋白具有免疫原性.
[목적]이위광견병병독위재체,구건표체저2형원배병독ORF2기인적중조병독,병연구기생물학특성.[방법]장저2형원배병독ORF2기인삽입도위광견병병독gG결실통용전이재체중,구건저2형원배병독-위광견병병독중조중간전이질립,연후장해질립여위광견병병독TK-/gG-/LacZ+기인조공전염IBRS-2세포,대발생세포병변후수집병독액진행중조병독적사선급생물학특성측정.[결과]이용검측PCV2 ORF2기인화LacZ기인적PCR방법사선도중조병독TK-/gG-/ORF2+,동시용Southern blotting증실외원기인PCV2 ORF2이성공삽입도TK-/gG-/LacZ+친본주적기인조중.간접면역형광시험(IFA)화Western blotting결과현시중조병독중PCV2 ORF2기인획득료성공표체.대중조병독적생물학특성연구표명,중조병독여기친본주재불동세포상적증식적도상당,차중조병독대소서무치병성,면역소서후가유도궤체산생항ORF2단백적특이성항체.[결론]중조위광견병독구건성공,차표체적ORF2단백구유면역원성.