中国兽医学报
中國獸醫學報
중국수의학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE
2008年
9期
996-999
,共4页
杨明柳%吴斌%汤细彪%蔡利军%刘国平%蔡旭旺%陈焕春
楊明柳%吳斌%湯細彪%蔡利軍%劉國平%蔡旭旺%陳煥春
양명류%오빈%탕세표%채리군%류국평%채욱왕%진환춘
致猪水肿病大肠杆菌%聚合酶链式反应%水肿毒素%F18ab菌毛
緻豬水腫病大腸桿菌%聚閤酶鏈式反應%水腫毒素%F18ab菌毛
치저수종병대장간균%취합매련식반응%수종독소%F18ab균모
本试验分别针对志贺样毒素Ⅱ型变异体(SLT-Ⅱe)B亚基和F18ab茼毛fedA亚基保守序列设计2对引物,扩增长度分别为230 bp和510 bp,通过条件优化,建立了一种快速鉴定致猪水肿病大肠杆菌同时确定其致病因子的二重聚合酶链式反应(PCR)检测方法,对阳性扩增产物测序,结果都有很高的保守性.特异性试验和灵敏性试验表明:与其他6种猪常见致病菌(产毒多杀性巴氏杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、波氏杆菌、副猪嗜血杆菌、沙门菌和链球菌)无交叉反应,菌体直接扩增法最低检出量为101cfu(D600为0.002).通过该二重PCR检测方法对2004-2006年自猪肺、脑组织中分离的216株大肠杆菌进行鉴定,得到6株致猪水肿病大肠杆菌,其中3株既具有菌毛又产水肿毒素,另外3株仅产水肿毒素;菌毛阳性菌株占毒素阳性菌株的50%.
本試驗分彆針對誌賀樣毒素Ⅱ型變異體(SLT-Ⅱe)B亞基和F18ab茼毛fedA亞基保守序列設計2對引物,擴增長度分彆為230 bp和510 bp,通過條件優化,建立瞭一種快速鑒定緻豬水腫病大腸桿菌同時確定其緻病因子的二重聚閤酶鏈式反應(PCR)檢測方法,對暘性擴增產物測序,結果都有很高的保守性.特異性試驗和靈敏性試驗錶明:與其他6種豬常見緻病菌(產毒多殺性巴氏桿菌、胸膜肺炎放線桿菌、波氏桿菌、副豬嗜血桿菌、沙門菌和鏈毬菌)無交扠反應,菌體直接擴增法最低檢齣量為101cfu(D600為0.002).通過該二重PCR檢測方法對2004-2006年自豬肺、腦組織中分離的216株大腸桿菌進行鑒定,得到6株緻豬水腫病大腸桿菌,其中3株既具有菌毛又產水腫毒素,另外3株僅產水腫毒素;菌毛暘性菌株佔毒素暘性菌株的50%.
본시험분별침대지하양독소Ⅱ형변이체(SLT-Ⅱe)B아기화F18ab동모fedA아기보수서렬설계2대인물,확증장도분별위230 bp화510 bp,통과조건우화,건립료일충쾌속감정치저수종병대장간균동시학정기치병인자적이중취합매련식반응(PCR)검측방법,대양성확증산물측서,결과도유흔고적보수성.특이성시험화령민성시험표명:여기타6충저상견치병균(산독다살성파씨간균、흉막폐염방선간균、파씨간균、부저기혈간균、사문균화련구균)무교차반응,균체직접확증법최저검출량위101cfu(D600위0.002).통과해이중PCR검측방법대2004-2006년자저폐、뇌조직중분리적216주대장간균진행감정,득도6주치저수종병대장간균,기중3주기구유균모우산수종독소,령외3주부산수종독소;균모양성균주점독소양성균주적50%.
