中国血吸虫病防治杂志
中國血吸蟲病防治雜誌
중국혈흡충병방치잡지
CHINESE JOURNAL OF SCHISTOSOMIASIS CONTROL
2009年
3期
193-196,封3
,共5页
陈勤%梁婉琪%曹建平%徐馀信%钱炳俊%张大兵%汤林华
陳勤%樑婉琪%曹建平%徐馀信%錢炳俊%張大兵%湯林華
진근%량완기%조건평%서여신%전병준%장대병%탕림화
恶性疟原虫%裂殖子表而蛋白1%免疫原性
噁性瘧原蟲%裂殖子錶而蛋白1%免疫原性
악성학원충%렬식자표이단백1%면역원성
目的 纯化大肠埃希菌Rosetta gami(DE3)表达的可溶性裂殖子表面蛋白1 C末端蛋白(MSP1-42,3D7株),检测其体外抑制恶性疟原虫生长的效果.方法 利用大肠埃希菌Rosetta gami(DE3)为宿主菌诱导表达MSP1-42,用带组氨酸标签的镍柱纯化可溶性的MSP1-42.6只新西兰白兔随机分为免疫组和对照组,每组3只.用MSP1-42与弗氏佐剂乳化后,皮下注射,抗原免疫剂量每次为200 Wg/只,共免疫4次,每次间隔2周.佐剂对照组以PBS代替抗原同法免疫.免疫前及末次免疫2周后取血,用酶联免疫吸附试验和间接荧光抗体试验检测血清中特异性抗体及其与天然抗原的反应,用含10%和20%免疫血清的培养基体外培养恶性疟原虫(海南分离株,Fcc1/HN),检测免疫血清体外抑制恶性疟原虫生长的效果.结果 经镍柱纯化后获得纯度为95%以上的MSP1-42蛋白;免疫组个体在第4次免疫后血清特异性抗体的滴度依次为1:640 000、1:640 000、1:160 000,间接荧光抗体试验检测表明MSP1-42免疫兔血清与恶性疟原虫表面蛋白有阳性反应;免疫血清能抑制恶性疟原虫在体外生长,在10%浓度时,3只免疫兔血清的抑制率依次为(51.9±24.2)%、(29.4±8.6)%和(86.7±7.4)%,在20%浓度时,抑制率分别为(93.3±7.5)%、(65.3±10.6)%和(96.4±1.0)%.结论 大肠埃希菌Rosetta gami(DE3)表达的MSP1-42蛋白免疫血清能识别恶性疟原虫天然抗原,体外培养能抑制恶性疟原虫的生长.
目的 純化大腸埃希菌Rosetta gami(DE3)錶達的可溶性裂殖子錶麵蛋白1 C末耑蛋白(MSP1-42,3D7株),檢測其體外抑製噁性瘧原蟲生長的效果.方法 利用大腸埃希菌Rosetta gami(DE3)為宿主菌誘導錶達MSP1-42,用帶組氨痠標籤的鎳柱純化可溶性的MSP1-42.6隻新西蘭白兔隨機分為免疫組和對照組,每組3隻.用MSP1-42與弗氏佐劑乳化後,皮下註射,抗原免疫劑量每次為200 Wg/隻,共免疫4次,每次間隔2週.佐劑對照組以PBS代替抗原同法免疫.免疫前及末次免疫2週後取血,用酶聯免疫吸附試驗和間接熒光抗體試驗檢測血清中特異性抗體及其與天然抗原的反應,用含10%和20%免疫血清的培養基體外培養噁性瘧原蟲(海南分離株,Fcc1/HN),檢測免疫血清體外抑製噁性瘧原蟲生長的效果.結果 經鎳柱純化後穫得純度為95%以上的MSP1-42蛋白;免疫組箇體在第4次免疫後血清特異性抗體的滴度依次為1:640 000、1:640 000、1:160 000,間接熒光抗體試驗檢測錶明MSP1-42免疫兔血清與噁性瘧原蟲錶麵蛋白有暘性反應;免疫血清能抑製噁性瘧原蟲在體外生長,在10%濃度時,3隻免疫兔血清的抑製率依次為(51.9±24.2)%、(29.4±8.6)%和(86.7±7.4)%,在20%濃度時,抑製率分彆為(93.3±7.5)%、(65.3±10.6)%和(96.4±1.0)%.結論 大腸埃希菌Rosetta gami(DE3)錶達的MSP1-42蛋白免疫血清能識彆噁性瘧原蟲天然抗原,體外培養能抑製噁性瘧原蟲的生長.
목적 순화대장애희균Rosetta gami(DE3)표체적가용성렬식자표면단백1 C말단단백(MSP1-42,3D7주),검측기체외억제악성학원충생장적효과.방법 이용대장애희균Rosetta gami(DE3)위숙주균유도표체MSP1-42,용대조안산표첨적얼주순화가용성적MSP1-42.6지신서란백토수궤분위면역조화대조조,매조3지.용MSP1-42여불씨좌제유화후,피하주사,항원면역제량매차위200 Wg/지,공면역4차,매차간격2주.좌제대조조이PBS대체항원동법면역.면역전급말차면역2주후취혈,용매련면역흡부시험화간접형광항체시험검측혈청중특이성항체급기여천연항원적반응,용함10%화20%면역혈청적배양기체외배양악성학원충(해남분리주,Fcc1/HN),검측면역혈청체외억제악성학원충생장적효과.결과 경얼주순화후획득순도위95%이상적MSP1-42단백;면역조개체재제4차면역후혈청특이성항체적적도의차위1:640 000、1:640 000、1:160 000,간접형광항체시험검측표명MSP1-42면역토혈청여악성학원충표면단백유양성반응;면역혈청능억제악성학원충재체외생장,재10%농도시,3지면역토혈청적억제솔의차위(51.9±24.2)%、(29.4±8.6)%화(86.7±7.4)%,재20%농도시,억제솔분별위(93.3±7.5)%、(65.3±10.6)%화(96.4±1.0)%.결론 대장애희균Rosetta gami(DE3)표체적MSP1-42단백면역혈청능식별악성학원충천연항원,체외배양능억제악성학원충적생장.
