西部医学
西部醫學
서부의학
MEDICAL JOURNAL OF WEST CHINA
2010年
3期
408-411
,共4页
粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子%重组表达载体%细胞分化
粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子%重組錶達載體%細胞分化
립세포-거서세포집락자격인자%중조표체재체%세포분화
目的 构建PcDNA3.1-rhGM-CSF真核细胞表达载体,初步观察其对髓系白血病细胞K562细胞生长的影响.方法 采用PCR、T-A克隆及基因定向克隆技术,将rhGM-CSF基因插入PcDNA3.1(+)空载体,构建了PcD-NA3.1-rhGM-CSF真核表达栽体.经限制性内切酶酶切和DNA测序进行鉴定.转染人髓系白血病细胞K562细胞72h后,采用RT-PCR方法、NBT试验、MTT试验、免疫组化技术,观察和分析PcDNA3.1-rhGM-CSF在K562细胞中的表达及其对该细胞的影响.结论 成功构建了PcDNA3.1-rhGM-CSF真核细胞表达载体;重组质粒PcDNA3.1-rh-GM-CSF能在K562细胞中表达;部分K562细胞向单核细胞系、巨噬细胞系分化. CSF基因插入PcDNA3.1(+)空载体,构建了PcD-NA3.1-rhGM-CSF真核表达栽体.经限制性内切酶酶切和DNA测序进行鉴定.转染人髓系白血病细胞K562细胞72h后,采用RT-PCR方法、NBT试验、MTT试验、免疫组化技术,观察和分析PcDNA3.1-rhGM-CSF在K562细胞中的表达及其对该细胞的影响.结论 成功构 了PcD
目的 構建PcDNA3.1-rhGM-CSF真覈細胞錶達載體,初步觀察其對髓繫白血病細胞K562細胞生長的影響.方法 採用PCR、T-A剋隆及基因定嚮剋隆技術,將rhGM-CSF基因插入PcDNA3.1(+)空載體,構建瞭PcD-NA3.1-rhGM-CSF真覈錶達栽體.經限製性內切酶酶切和DNA測序進行鑒定.轉染人髓繫白血病細胞K562細胞72h後,採用RT-PCR方法、NBT試驗、MTT試驗、免疫組化技術,觀察和分析PcDNA3.1-rhGM-CSF在K562細胞中的錶達及其對該細胞的影響.結論 成功構建瞭PcDNA3.1-rhGM-CSF真覈細胞錶達載體;重組質粒PcDNA3.1-rh-GM-CSF能在K562細胞中錶達;部分K562細胞嚮單覈細胞繫、巨噬細胞繫分化. CSF基因插入PcDNA3.1(+)空載體,構建瞭PcD-NA3.1-rhGM-CSF真覈錶達栽體.經限製性內切酶酶切和DNA測序進行鑒定.轉染人髓繫白血病細胞K562細胞72h後,採用RT-PCR方法、NBT試驗、MTT試驗、免疫組化技術,觀察和分析PcDNA3.1-rhGM-CSF在K562細胞中的錶達及其對該細胞的影響.結論 成功構 瞭PcD
목적 구건PcDNA3.1-rhGM-CSF진핵세포표체재체,초보관찰기대수계백혈병세포K562세포생장적영향.방법 채용PCR、T-A극륭급기인정향극륭기술,장rhGM-CSF기인삽입PcDNA3.1(+)공재체,구건료PcD-NA3.1-rhGM-CSF진핵표체재체.경한제성내절매매절화DNA측서진행감정.전염인수계백혈병세포K562세포72h후,채용RT-PCR방법、NBT시험、MTT시험、면역조화기술,관찰화분석PcDNA3.1-rhGM-CSF재K562세포중적표체급기대해세포적영향.결론 성공구건료PcDNA3.1-rhGM-CSF진핵세포표체재체;중조질립PcDNA3.1-rh-GM-CSF능재K562세포중표체;부분K562세포향단핵세포계、거서세포계분화. CSF기인삽입PcDNA3.1(+)공재체,구건료PcD-NA3.1-rhGM-CSF진핵표체재체.경한제성내절매매절화DNA측서진행감정.전염인수계백혈병세포K562세포72h후,채용RT-PCR방법、NBT시험、MTT시험、면역조화기술,관찰화분석PcDNA3.1-rhGM-CSF재K562세포중적표체급기대해세포적영향.결론 성공구 료PcD