西安交通大学学报（医学版）
西安交通大學學報（醫學版）
서안교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF XI'AN JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2012年
4期
460-465
,共6页
王坚%林茂%吴平%何惠娟%刘新垣
王堅%林茂%吳平%何惠娟%劉新垣
왕견%림무%오평%하혜연%류신원
重组腺相关病毒%第2个线粒体衍生的半胱天冬蛋白酶激活剂/低pI的IAP直接结合蛋白(Smac/DIABLO)%恶性黑色素瘤%丝裂霉素C%凋亡
重組腺相關病毒%第2箇線粒體衍生的半胱天鼕蛋白酶激活劑/低pI的IAP直接結閤蛋白(Smac/DIABLO)%噁性黑色素瘤%絲裂黴素C%凋亡
중조선상관병독%제2개선립체연생적반광천동단백매격활제/저pI적IAP직접결합단백(Smac/DIABLO)%악성흑색소류%사렬매소C%조망
目的 探讨重组腺相关病毒(rAAV)介导促凋亡因子Smac/DIABLO是否能提高恶性黑色素瘤细胞对丝裂霉素(MMC)的敏感性.方法 将携有目的基因的rAAV加入到培养液中转染肿瘤细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白(EGFP)的表达,RT-PCR检测Smac/DIABLO基因的表达,MTT法测定肿瘤细胞增殖,流式细胞术测定肿瘤细胞的凋亡；动物在体实验测定抗肿瘤效果.结果 rAAV转染96 h后几乎所有细胞表达明亮的黄绿色荧光.RT-PCR检测发现转染48h后目的基因Smac/DIABLO稳定表达.MTT检测显示rAAV-hTERT/Smac/DIABLO+ MMC对肿瘤细胞的抑制率最高(P＜0.05).流式细胞检测结果显示,rAAV-hTERT/Smac/DIABLO+ MMC组肿瘤细胞的凋亡率明显高于生理盐水(HBSS)组、MMC组和rAAV-hTERT/Smac/DIABLO组(P＜0.01).动物实验结果表明,rAAV-hTERT/Smac/DIABLO+ MMC有非常强的抑制肿瘤作用,其抗癌效果优于HBSS、MMC、rAAV-hTERT/EGFP和rAAV-hTERT/Smac/DIABL组.结论 rAAV- hTERT/Smac/DIABLO在体内、体外均能提高肿瘤细胞对MMC的敏感性.此作用与Smac/DIABLO的促凋亡作用有关.
目的 探討重組腺相關病毒(rAAV)介導促凋亡因子Smac/DIABLO是否能提高噁性黑色素瘤細胞對絲裂黴素(MMC)的敏感性.方法 將攜有目的基因的rAAV加入到培養液中轉染腫瘤細胞,熒光顯微鏡觀察綠色熒光蛋白(EGFP)的錶達,RT-PCR檢測Smac/DIABLO基因的錶達,MTT法測定腫瘤細胞增殖,流式細胞術測定腫瘤細胞的凋亡；動物在體實驗測定抗腫瘤效果.結果 rAAV轉染96 h後幾乎所有細胞錶達明亮的黃綠色熒光.RT-PCR檢測髮現轉染48h後目的基因Smac/DIABLO穩定錶達.MTT檢測顯示rAAV-hTERT/Smac/DIABLO+ MMC對腫瘤細胞的抑製率最高(P＜0.05).流式細胞檢測結果顯示,rAAV-hTERT/Smac/DIABLO+ MMC組腫瘤細胞的凋亡率明顯高于生理鹽水(HBSS)組、MMC組和rAAV-hTERT/Smac/DIABLO組(P＜0.01).動物實驗結果錶明,rAAV-hTERT/Smac/DIABLO+ MMC有非常彊的抑製腫瘤作用,其抗癌效果優于HBSS、MMC、rAAV-hTERT/EGFP和rAAV-hTERT/Smac/DIABL組.結論 rAAV- hTERT/Smac/DIABLO在體內、體外均能提高腫瘤細胞對MMC的敏感性.此作用與Smac/DIABLO的促凋亡作用有關.
목적 탐토중조선상관병독(rAAV)개도촉조망인자Smac/DIABLO시부능제고악성흑색소류세포대사렬매소(MMC)적민감성.방법 장휴유목적기인적rAAV가입도배양액중전염종류세포,형광현미경관찰록색형광단백(EGFP)적표체,RT-PCR검측Smac/DIABLO기인적표체,MTT법측정종류세포증식,류식세포술측정종류세포적조망；동물재체실험측정항종류효과.결과 rAAV전염96 h후궤호소유세포표체명량적황록색형광.RT-PCR검측발현전염48h후목적기인Smac/DIABLO은정표체.MTT검측현시rAAV-hTERT/Smac/DIABLO+ MMC대종류세포적억제솔최고(P＜0.05).류식세포검측결과현시,rAAV-hTERT/Smac/DIABLO+ MMC조종류세포적조망솔명현고우생리염수(HBSS)조、MMC조화rAAV-hTERT/Smac/DIABLO조(P＜0.01).동물실험결과표명,rAAV-hTERT/Smac/DIABLO+ MMC유비상강적억제종류작용,기항암효과우우HBSS、MMC、rAAV-hTERT/EGFP화rAAV-hTERT/Smac/DIABL조.결론 rAAV- hTERT/Smac/DIABLO재체내、체외균능제고종류세포대MMC적민감성.차작용여Smac/DIABLO적촉조망작용유관.
