眼科研究
眼科研究
안과연구
CHINESE OPHTHALMIC RESEARCH
2007年
7期
489-493
,共5页
马慧香%徐锦堂%姜振友%赵松滨%陈建苏
馬慧香%徐錦堂%薑振友%趙鬆濱%陳建囌
마혜향%서금당%강진우%조송빈%진건소
转化生长因子-β1%基因转染%淋巴细胞%免疫
轉化生長因子-β1%基因轉染%淋巴細胞%免疫
전화생장인자-β1%기인전염%림파세포%면역
目的 探讨TGF-β1基因转染角膜内皮细胞后表达产物的免疫学活性. 方法 分别用RT-PCR、Western blot、免疫组织化学法检测pSecTag2-TGF-β1 MP质粒转染角膜内皮细胞48 h后TGF-β1基因的表达,ELISA法检测TGF-β1浓度;MTT法检测其对ConA诱导的淋巴细胞转化反应的影响;用流式细胞仪法检测其对淋巴细胞凋亡以及淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+、CD25+、CD69+、CD71+亚群分化的影响.结果从mRNA转录和蛋白质水平均证实TGF-β1基因在角膜内皮细胞获得高效表达.瞬时转染48 h角膜内皮细胞培养上清中TGF-β1的表达为(98±3)pg/ml,高于对照组.在其作用下淋巴细胞活化增生受抑制;出现明显的亚二倍体峰;CD25+、CD69+、CD71+阳性细胞比率下降. 结论 基因转染角膜内皮细胞高表达TGF-β1,可抑制淋巴细胞的活化增生,促使淋巴细胞凋亡.
目的 探討TGF-β1基因轉染角膜內皮細胞後錶達產物的免疫學活性. 方法 分彆用RT-PCR、Western blot、免疫組織化學法檢測pSecTag2-TGF-β1 MP質粒轉染角膜內皮細胞48 h後TGF-β1基因的錶達,ELISA法檢測TGF-β1濃度;MTT法檢測其對ConA誘導的淋巴細胞轉化反應的影響;用流式細胞儀法檢測其對淋巴細胞凋亡以及淋巴細胞CD3+、CD4+、CD8+、CD25+、CD69+、CD71+亞群分化的影響.結果從mRNA轉錄和蛋白質水平均證實TGF-β1基因在角膜內皮細胞穫得高效錶達.瞬時轉染48 h角膜內皮細胞培養上清中TGF-β1的錶達為(98±3)pg/ml,高于對照組.在其作用下淋巴細胞活化增生受抑製;齣現明顯的亞二倍體峰;CD25+、CD69+、CD71+暘性細胞比率下降. 結論 基因轉染角膜內皮細胞高錶達TGF-β1,可抑製淋巴細胞的活化增生,促使淋巴細胞凋亡.
목적 탐토TGF-β1기인전염각막내피세포후표체산물적면역학활성. 방법 분별용RT-PCR、Western blot、면역조직화학법검측pSecTag2-TGF-β1 MP질립전염각막내피세포48 h후TGF-β1기인적표체,ELISA법검측TGF-β1농도;MTT법검측기대ConA유도적림파세포전화반응적영향;용류식세포의법검측기대림파세포조망이급림파세포CD3+、CD4+、CD8+、CD25+、CD69+、CD71+아군분화적영향.결과종mRNA전록화단백질수평균증실TGF-β1기인재각막내피세포획득고효표체.순시전염48 h각막내피세포배양상청중TGF-β1적표체위(98±3)pg/ml,고우대조조.재기작용하림파세포활화증생수억제;출현명현적아이배체봉;CD25+、CD69+、CD71+양성세포비솔하강. 결론 기인전염각막내피세포고표체TGF-β1,가억제림파세포적활화증생,촉사림파세포조망.