中华传染病杂志
中華傳染病雜誌
중화전염병잡지
CHINESE JOURNAL OF INFECTIOUS DISEASES
2007年
5期
268-271
,共4页
徐兵%潘晨%蒋晓织%林曼芝%陈敏%林灼%陈怡%陈惠聪
徐兵%潘晨%蔣曉織%林曼芝%陳敏%林灼%陳怡%陳惠聰
서병%반신%장효직%림만지%진민%림작%진이%진혜총
肝,人工%氢离子浓度%沉淀%盐析法%血蛋白质类%回收
肝,人工%氫離子濃度%沉澱%鹽析法%血蛋白質類%迴收
간,인공%경리자농도%침정%염석법%혈단백질류%회수
目的 建立在体外快速回收人工肝丢弃血浆总蛋白的方法.方法 设计一种梯度pH共沉淀法,从pH 7.3开始,逐滴加入1 mol/L柠檬酸溶液,5 h加完,使溶液pH值呈渐进梯度变化,至终点pH 5.1,用此法配合盐析法(氯化钠饱和度33%,4 ℃反应5.5 h)或低温乙醇沉淀法(乙醇体积分数为0.04,-7 ℃反应5.5 h),使等电点在pH 7.3～5.1范围内的各蛋白连环碰撞聚集而析出,形成多蛋白共沉淀,再一并回收,弃上清液以清除毒物.结果 在pH 7.3～5.1范围内,用梯度pH低温乙醇法和梯度pH盐析法分别回收了41%(25 g/61 g)和50%(29 g/57 g)的血浆蛋白,上清液中未回收的蛋白主要是白蛋白及其所结合的胆红素.两法回收的蛋白溶液中,TBil下降,分别为回收前的0.07%(低温乙醇法)和0.06%(盐析法),HBV DNA降为阴性(PCR).结论 在高浓度中性盐或低温乙醇条件下,渐进微调溶液pH值,可使一连串有相邻等电点的蛋白共沉淀,采用梯度pH共沉淀法可选择性快速回收人工肝丢弃血浆中总蛋白.
目的 建立在體外快速迴收人工肝丟棄血漿總蛋白的方法.方法 設計一種梯度pH共沉澱法,從pH 7.3開始,逐滴加入1 mol/L檸檬痠溶液,5 h加完,使溶液pH值呈漸進梯度變化,至終點pH 5.1,用此法配閤鹽析法(氯化鈉飽和度33%,4 ℃反應5.5 h)或低溫乙醇沉澱法(乙醇體積分數為0.04,-7 ℃反應5.5 h),使等電點在pH 7.3～5.1範圍內的各蛋白連環踫撞聚集而析齣,形成多蛋白共沉澱,再一併迴收,棄上清液以清除毒物.結果 在pH 7.3～5.1範圍內,用梯度pH低溫乙醇法和梯度pH鹽析法分彆迴收瞭41%(25 g/61 g)和50%(29 g/57 g)的血漿蛋白,上清液中未迴收的蛋白主要是白蛋白及其所結閤的膽紅素.兩法迴收的蛋白溶液中,TBil下降,分彆為迴收前的0.07%(低溫乙醇法)和0.06%(鹽析法),HBV DNA降為陰性(PCR).結論 在高濃度中性鹽或低溫乙醇條件下,漸進微調溶液pH值,可使一連串有相鄰等電點的蛋白共沉澱,採用梯度pH共沉澱法可選擇性快速迴收人工肝丟棄血漿中總蛋白.
목적 건립재체외쾌속회수인공간주기혈장총단백적방법.방법 설계일충제도pH공침정법,종pH 7.3개시,축적가입1 mol/L저몽산용액,5 h가완,사용액pH치정점진제도변화,지종점pH 5.1,용차법배합염석법(록화납포화도33%,4 ℃반응5.5 h)혹저온을순침정법(을순체적분수위0.04,-7 ℃반응5.5 h),사등전점재pH 7.3～5.1범위내적각단백련배팽당취집이석출,형성다단백공침정,재일병회수,기상청액이청제독물.결과 재pH 7.3～5.1범위내,용제도pH저온을순법화제도pH염석법분별회수료41%(25 g/61 g)화50%(29 g/57 g)적혈장단백,상청액중미회수적단백주요시백단백급기소결합적담홍소.량법회수적단백용액중,TBil하강,분별위회수전적0.07%(저온을순법)화0.06%(염석법),HBV DNA강위음성(PCR).결론 재고농도중성염혹저온을순조건하,점진미조용액pH치,가사일련천유상린등전점적단백공침정,채용제도pH공침정법가선택성쾌속회수인공간주기혈장중총단백.
