实用儿科临床杂志
實用兒科臨床雜誌
실용인과림상잡지
Journal of Applied Clinical Pediatrics
2009年
6期
475-477
,共3页
刘鹏%俞松%侯晻%曹江%朱明
劉鵬%俞鬆%侯晻%曹江%硃明
류붕%유송%후엄%조강%주명
血管瘤%细胞培养%凋亡
血管瘤%細胞培養%凋亡
혈관류%세포배양%조망
目的 观察体外培养血管瘤血管内皮细胞的凋亡与Caspase-8、Fas的关系,探讨血管瘤血管内皮细胞的凋亡通路.方法 应用组织块法培养血管瘤血管内皮细胞,待长成单层细胞以后传代,建立血管瘤血管内皮细胞系,观察其增殖特征,并用第Ⅷ凝血因子相关抗原进行鉴定.收集以上培养的细胞,顺序加入膜联蛋白-V-异硫氰酸荧光素及碘化丙锭溶液双染色上机,Cell Quest软件分析结果,同期取相同状态细胞,用流式细胞仪检测Caspase-8的表达,免疫组织化学法检测Fas的表达,Fas以细胞膜及细胞质出现红色为阳性细胞.比较Caspase-8、Fas在血管瘤血管内皮细胞离体培养过程中不同时期的表达情况.结果 培养的血管瘤血管内皮细胞于24 h后开始贴壁生长,1周后只有少最细胞铺展贴壁生长,2周后开始生长分裂,3周后开始快速生长,4周后细胞铺满板底.相差倒置显微镜观察,发现所分离的内皮细胞呈上皮细胞形态.培养细胞第Ⅷ凝血因子相关抗原表达为阳性.血管瘤血管内皮细胞凋亡率高时[(18.88±3.32)%],Caspase-8、Fas呈高表达;血管瘤血管内皮细胞凋亡率低时[(3.25±0.23)%],Cagpase-8、Fas呈低表达,血管瘤血管内皮细胞高凋亡率与低凋亡率比较差异有统计学意义(t=10.34 P<0.01).结论 Cagpase-8、Fas参与了体外培养人血管瘤内皮细胞凋亡的调节,体外培养血管瘤内皮细胞的凋亡可能是通过死亡受体通路来实现的.
目的 觀察體外培養血管瘤血管內皮細胞的凋亡與Caspase-8、Fas的關繫,探討血管瘤血管內皮細胞的凋亡通路.方法 應用組織塊法培養血管瘤血管內皮細胞,待長成單層細胞以後傳代,建立血管瘤血管內皮細胞繫,觀察其增殖特徵,併用第Ⅷ凝血因子相關抗原進行鑒定.收集以上培養的細胞,順序加入膜聯蛋白-V-異硫氰痠熒光素及碘化丙錠溶液雙染色上機,Cell Quest軟件分析結果,同期取相同狀態細胞,用流式細胞儀檢測Caspase-8的錶達,免疫組織化學法檢測Fas的錶達,Fas以細胞膜及細胞質齣現紅色為暘性細胞.比較Caspase-8、Fas在血管瘤血管內皮細胞離體培養過程中不同時期的錶達情況.結果 培養的血管瘤血管內皮細胞于24 h後開始貼壁生長,1週後隻有少最細胞鋪展貼壁生長,2週後開始生長分裂,3週後開始快速生長,4週後細胞鋪滿闆底.相差倒置顯微鏡觀察,髮現所分離的內皮細胞呈上皮細胞形態.培養細胞第Ⅷ凝血因子相關抗原錶達為暘性.血管瘤血管內皮細胞凋亡率高時[(18.88±3.32)%],Caspase-8、Fas呈高錶達;血管瘤血管內皮細胞凋亡率低時[(3.25±0.23)%],Cagpase-8、Fas呈低錶達,血管瘤血管內皮細胞高凋亡率與低凋亡率比較差異有統計學意義(t=10.34 P<0.01).結論 Cagpase-8、Fas參與瞭體外培養人血管瘤內皮細胞凋亡的調節,體外培養血管瘤內皮細胞的凋亡可能是通過死亡受體通路來實現的.
목적 관찰체외배양혈관류혈관내피세포적조망여Caspase-8、Fas적관계,탐토혈관류혈관내피세포적조망통로.방법 응용조직괴법배양혈관류혈관내피세포,대장성단층세포이후전대,건립혈관류혈관내피세포계,관찰기증식특정,병용제Ⅷ응혈인자상관항원진행감정.수집이상배양적세포,순서가입막련단백-V-이류청산형광소급전화병정용액쌍염색상궤,Cell Quest연건분석결과,동기취상동상태세포,용류식세포의검측Caspase-8적표체,면역조직화학법검측Fas적표체,Fas이세포막급세포질출현홍색위양성세포.비교Caspase-8、Fas재혈관류혈관내피세포리체배양과정중불동시기적표체정황.결과 배양적혈관류혈관내피세포우24 h후개시첩벽생장,1주후지유소최세포포전첩벽생장,2주후개시생장분렬,3주후개시쾌속생장,4주후세포포만판저.상차도치현미경관찰,발현소분리적내피세포정상피세포형태.배양세포제Ⅷ응혈인자상관항원표체위양성.혈관류혈관내피세포조망솔고시[(18.88±3.32)%],Caspase-8、Fas정고표체;혈관류혈관내피세포조망솔저시[(3.25±0.23)%],Cagpase-8、Fas정저표체,혈관류혈관내피세포고조망솔여저조망솔비교차이유통계학의의(t=10.34 P<0.01).결론 Cagpase-8、Fas삼여료체외배양인혈관류내피세포조망적조절,체외배양혈관류내피세포적조망가능시통과사망수체통로래실현적.
