CAJ | 학술논문

用PCR方法分别扩增出BmNPV几丁质酶基因编码区全片段和去信号肽片段.将全片段克隆入原核表达载体pET28a,在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)进行融合表达.将去信号肽片段克隆入pFastBacb转移载体,重组到杆状病毒Bac-to-Bac表达系统,在粉纹夜蛾(Trichoplusia ni)细胞系(Tn-5B1-4)中进行融合表达.SDS-PAGE分析和薄层扫描显示,2片段均得到高效表达,表达产物分别占细胞总蛋白的22%和12%.将以上2种表达产物加入Bt菌液中喂食2龄家蚕(Bombyxmori),观察并记录不同处理下家蚕的死亡时间及体重.结果表明,2种表达产物对Bt杀虫剂均有明显的增效作用.取食添加以上2种表达产物的家蚕与对照处理相比,LT50分别提前24.5和24.6 h,体重增量约是对照组的1/4.
용PCR방법분별확증출BmNPV궤정질매기인편마구전편단화거신호태편단.장전편단극륭입원핵표체재체pET28a,재대장간균(Escherichia coli)BL21(DE3)진행융합표체.장거신호태편단극륭입pFastBacb전이재체,중조도간상병독Bac-to-Bac표체계통,재분문야아(Trichoplusia ni)세포계(Tn-5B1-4)중진행융합표체.SDS-PAGE분석화박층소묘현시,2편단균득도고효표체,표체산물분별점세포총단백적22%화12%.장이상2충표체산물가입Bt균액중위식2령가잠(Bombyxmori),관찰병기록불동처리하가잠적사망시간급체중.결과표명,2충표체산물대Bt살충제균유명현적증효작용.취식첨가이상2충표체산물적가잠여대조처리상비,LT50분별제전24.5화24.6 h,체중증량약시대조조적1/4.