中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2005年
3期
164-166,170
,共4页
陈金顶%赵明秋%索青利%黄青云%廖明
陳金頂%趙明鞦%索青利%黃青雲%廖明
진금정%조명추%색청리%황청운%료명
抗体信号肽%基因克隆%序列测定%载体构建
抗體信號肽%基因剋隆%序列測定%載體構建
항체신호태%기인극륭%서렬측정%재체구건
根据抗体重链与轻链基因的核苷酸序列设计并合成了1对引物,以猪外周血淋巴细胞基因组mRNA为模板,通过RT-PCR方法获得了一大小约85 bp的DNA片段,并将其克隆到pGEM-T载体上进行序列测定,测序结果显示,猪抗体信号肽基因核苷酸序列长度为57 bp,编码19个氨基酸,核苷酸及推导的氨基酸序列与已发表的抗体信号肽基因序列一致,同时在信号肽基因3'端下游提供可供肽酶切割的窗口和外源基因的克隆位点.然后将信号肽基因亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,成功构建了一含信号肽序列的真核表达载体3.1-SFc,为外源基因在pcDNA3.1(+)中的表达与分泌提供了一有效的信号肽,也为研究基因的功能奠定了基础.
根據抗體重鏈與輕鏈基因的覈苷痠序列設計併閤成瞭1對引物,以豬外週血淋巴細胞基因組mRNA為模闆,通過RT-PCR方法穫得瞭一大小約85 bp的DNA片段,併將其剋隆到pGEM-T載體上進行序列測定,測序結果顯示,豬抗體信號肽基因覈苷痠序列長度為57 bp,編碼19箇氨基痠,覈苷痠及推導的氨基痠序列與已髮錶的抗體信號肽基因序列一緻,同時在信號肽基因3'耑下遊提供可供肽酶切割的窗口和外源基因的剋隆位點.然後將信號肽基因亞剋隆到真覈錶達載體pcDNA3.1(+)中,成功構建瞭一含信號肽序列的真覈錶達載體3.1-SFc,為外源基因在pcDNA3.1(+)中的錶達與分泌提供瞭一有效的信號肽,也為研究基因的功能奠定瞭基礎.
근거항체중련여경련기인적핵감산서렬설계병합성료1대인물,이저외주혈림파세포기인조mRNA위모판,통과RT-PCR방법획득료일대소약85 bp적DNA편단,병장기극륭도pGEM-T재체상진행서렬측정,측서결과현시,저항체신호태기인핵감산서렬장도위57 bp,편마19개안기산,핵감산급추도적안기산서렬여이발표적항체신호태기인서렬일치,동시재신호태기인3'단하유제공가공태매절할적창구화외원기인적극륭위점.연후장신호태기인아극륭도진핵표체재체pcDNA3.1(+)중,성공구건료일함신호태서렬적진핵표체재체3.1-SFc,위외원기인재pcDNA3.1(+)중적표체여분비제공료일유효적신호태,야위연구기인적공능전정료기출.
