生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2006年
4期
574-576
,共3页
傅蓉%刘刚%戴红梅%刘党生%汤国营%陈惠鹏
傅蓉%劉剛%戴紅梅%劉黨生%湯國營%陳惠鵬
부용%류강%대홍매%류당생%탕국영%진혜붕
HER2/neu胞外配体结合区%噬菌体抗体库%ELISA
HER2/neu胞外配體結閤區%噬菌體抗體庫%ELISA
HER2/neu포외배체결합구%서균체항체고%ELISA
目的:利用HER2/neu胞外配体结合区2(RLD2)从噬菌体抗体库中筛选相应抗体,并进行初步检测.方法:设计合成引物,利用PCR方法克隆出RLD2基因后,将其连接到pET-24a(+)载体中,在大肠杆菌中实现高效表达.对包涵体蛋白经纯化、透析复性后得到目的蛋白.以得到的目的蛋白为靶标,从人源性噬菌体抗体库中进行4轮筛选得到抗体,经ELISA法初步鉴定,并用MTT法检测阳性克隆.结果与结论:初步得到6株亲和力较高的抗HER2/neu抗体,选取其中2株进行了MTT法检测,表明对HER2高表达的乳腺癌细胞有较明显的抑制作用.
目的:利用HER2/neu胞外配體結閤區2(RLD2)從噬菌體抗體庫中篩選相應抗體,併進行初步檢測.方法:設計閤成引物,利用PCR方法剋隆齣RLD2基因後,將其連接到pET-24a(+)載體中,在大腸桿菌中實現高效錶達.對包涵體蛋白經純化、透析複性後得到目的蛋白.以得到的目的蛋白為靶標,從人源性噬菌體抗體庫中進行4輪篩選得到抗體,經ELISA法初步鑒定,併用MTT法檢測暘性剋隆.結果與結論:初步得到6株親和力較高的抗HER2/neu抗體,選取其中2株進行瞭MTT法檢測,錶明對HER2高錶達的乳腺癌細胞有較明顯的抑製作用.
목적:이용HER2/neu포외배체결합구2(RLD2)종서균체항체고중사선상응항체,병진행초보검측.방법:설계합성인물,이용PCR방법극륭출RLD2기인후,장기련접도pET-24a(+)재체중,재대장간균중실현고효표체.대포함체단백경순화、투석복성후득도목적단백.이득도적목적단백위파표,종인원성서균체항체고중진행4륜사선득도항체,경ELISA법초보감정,병용MTT법검측양성극륭.결과여결론:초보득도6주친화력교고적항HER2/neu항체,선취기중2주진행료MTT법검측,표명대HER2고표체적유선암세포유교명현적억제작용.
