中国寄生虫学与寄生虫病杂志
中國寄生蟲學與寄生蟲病雜誌
중국기생충학여기생충병잡지
CHINESE JOURNAL OF PARASITOLOGY AND PARASITIC DISEASES
2007年
3期
193-197
,共5页
王成祖%莫红梅%程喻力%王磊%蒋自卫%刘文琪%李雍龙
王成祖%莫紅梅%程喻力%王磊%蔣自衛%劉文琪%李雍龍
왕성조%막홍매%정유력%왕뢰%장자위%류문기%리옹룡
卵黄免疫球蛋白%日本血吸虫%免疫诊断%循环抗原
卵黃免疫毬蛋白%日本血吸蟲%免疫診斷%循環抗原
란황면역구단백%일본혈흡충%면역진단%순배항원
目的 制备特异性抗日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)的鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)并检测其特异性、敏感性.方法 用日本血吸虫SEA经翅膀下静脉和皮下免疫25周龄海兰母鸡4次(首次剂量为60μg/只,加强剂量为30μg/只),每次间隔10 d.取免疫前和首次免疫后35 d的鸡蛋卵黄,分别用水稀释法提取IgY,BCA法测定蛋白含量,并进行十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blotting)分析,ELISA检测纯化后IgY特异性和敏感性.分别提取免疫后不同时间的卵黄抗体,观察抗体效价的变化.结果 海兰母鸡经SEA首次免疫后35 d,每枚蛋经提纯后可得到约61 mg抗体,经SDS-PAGE和Western blotting分析,纯化的IgY有1条主要蛋白带,相对分子质量(Mr)为130 000,并可被SEA识别.母鸡初次免疫后第10天,经SDS-PAGE和ELISA分析,鸡蛋卵黄内即有抗体产生,初次免疫后31 d效价可达1∶1 600.双抗体夹心ELISA结果显示纯化后的IgY有较高的敏感性,可检测到的SEA达2.4 ng/ml.结论 制备的抗SEA鸡卵黄抗体的特异性和敏感性均较高.
目的 製備特異性抗日本血吸蟲可溶性蟲卵抗原(SEA)的鷄卵黃免疫毬蛋白(IgY)併檢測其特異性、敏感性.方法 用日本血吸蟲SEA經翅膀下靜脈和皮下免疫25週齡海蘭母鷄4次(首次劑量為60μg/隻,加彊劑量為30μg/隻),每次間隔10 d.取免疫前和首次免疫後35 d的鷄蛋卵黃,分彆用水稀釋法提取IgY,BCA法測定蛋白含量,併進行十二烷基磺痠鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)和蛋白質印跡(Western blotting)分析,ELISA檢測純化後IgY特異性和敏感性.分彆提取免疫後不同時間的卵黃抗體,觀察抗體效價的變化.結果 海蘭母鷄經SEA首次免疫後35 d,每枚蛋經提純後可得到約61 mg抗體,經SDS-PAGE和Western blotting分析,純化的IgY有1條主要蛋白帶,相對分子質量(Mr)為130 000,併可被SEA識彆.母鷄初次免疫後第10天,經SDS-PAGE和ELISA分析,鷄蛋卵黃內即有抗體產生,初次免疫後31 d效價可達1∶1 600.雙抗體夾心ELISA結果顯示純化後的IgY有較高的敏感性,可檢測到的SEA達2.4 ng/ml.結論 製備的抗SEA鷄卵黃抗體的特異性和敏感性均較高.
목적 제비특이성항일본혈흡충가용성충란항원(SEA)적계란황면역구단백(IgY)병검측기특이성、민감성.방법 용일본혈흡충SEA경시방하정맥화피하면역25주령해란모계4차(수차제량위60μg/지,가강제량위30μg/지),매차간격10 d.취면역전화수차면역후35 d적계단란황,분별용수희석법제취IgY,BCA법측정단백함량,병진행십이완기광산납-취병희선알응효전영(SDS-PAGE)화단백질인적(Western blotting)분석,ELISA검측순화후IgY특이성화민감성.분별제취면역후불동시간적란황항체,관찰항체효개적변화.결과 해란모계경SEA수차면역후35 d,매매단경제순후가득도약61 mg항체,경SDS-PAGE화Western blotting분석,순화적IgY유1조주요단백대,상대분자질량(Mr)위130 000,병가피SEA식별.모계초차면역후제10천,경SDS-PAGE화ELISA분석,계단란황내즉유항체산생,초차면역후31 d효개가체1∶1 600.쌍항체협심ELISA결과현시순화후적IgY유교고적민감성,가검측도적SEA체2.4 ng/ml.결론 제비적항SEA계란황항체적특이성화민감성균교고.
