中国农业科技导报
中國農業科技導報
중국농업과기도보
REVIEW OF CHINA AGRICULTURAL SCIENCE AND TECHNOLOGY
2008年
3期
64-70
,共7页
景福远%张凌%李美芽%唐克轩
景福遠%張凌%李美芽%唐剋軒
경복원%장릉%리미아%당극헌
青蒿%青蒿素%cyp71avl基因%cpr基因
青蒿%青蒿素%cyp71avl基因%cpr基因
청호%청호소%cyp71avl기인%cpr기인
青蒿素是从青蒿植株地上部分提取的一种含有过氧桥结构的倍半萜内酯,是目前最有效的治疗疟疾的药物.为了提高青蒿中青蒿素的含量,根据GenBank中青蒿紫穗槐二烯氧化酶(CYP71AVl)和细胞色素P450还原酶(CPR)的基因序列设计特异引物,从青蒿cDNA中扩增出了cyp71avl和cpr基因片段,分别连上CaMV 35S启动子和NOS终止子,然后将cyp71avl和cpr基因的表达盒依次插入到植物表达载体pCAMBIA300中,获得含有cyp71avl和cpr基因的植物表达载体p2300-GYR.通过农杆菌介导法转化青蒿,获得了20株转基因植株,PCR检测以及Southern杂交分析证实外源基因已被成功地导入青蒿基因组中.采用HPLC-ELSD测定转基因青蒿中青蒿素的含量,结果表明,大部分转基因青蒿中青蒿素的含量高于对照植株,其中,转基因青蒿中青蒿素含量最高约为对照的2.4倍.该研究证明过量表达cyp71avl和cpr基因是提高青蒿中青蒿素含量的有效方法.
青蒿素是從青蒿植株地上部分提取的一種含有過氧橋結構的倍半萜內酯,是目前最有效的治療瘧疾的藥物.為瞭提高青蒿中青蒿素的含量,根據GenBank中青蒿紫穗槐二烯氧化酶(CYP71AVl)和細胞色素P450還原酶(CPR)的基因序列設計特異引物,從青蒿cDNA中擴增齣瞭cyp71avl和cpr基因片段,分彆連上CaMV 35S啟動子和NOS終止子,然後將cyp71avl和cpr基因的錶達盒依次插入到植物錶達載體pCAMBIA300中,穫得含有cyp71avl和cpr基因的植物錶達載體p2300-GYR.通過農桿菌介導法轉化青蒿,穫得瞭20株轉基因植株,PCR檢測以及Southern雜交分析證實外源基因已被成功地導入青蒿基因組中.採用HPLC-ELSD測定轉基因青蒿中青蒿素的含量,結果錶明,大部分轉基因青蒿中青蒿素的含量高于對照植株,其中,轉基因青蒿中青蒿素含量最高約為對照的2.4倍.該研究證明過量錶達cyp71avl和cpr基因是提高青蒿中青蒿素含量的有效方法.
청호소시종청호식주지상부분제취적일충함유과양교결구적배반첩내지,시목전최유효적치료학질적약물.위료제고청호중청호소적함량,근거GenBank중청호자수괴이희양화매(CYP71AVl)화세포색소P450환원매(CPR)적기인서렬설계특이인물,종청호cDNA중확증출료cyp71avl화cpr기인편단,분별련상CaMV 35S계동자화NOS종지자,연후장cyp71avl화cpr기인적표체합의차삽입도식물표체재체pCAMBIA300중,획득함유cyp71avl화cpr기인적식물표체재체p2300-GYR.통과농간균개도법전화청호,획득료20주전기인식주,PCR검측이급Southern잡교분석증실외원기인이피성공지도입청호기인조중.채용HPLC-ELSD측정전기인청호중청호소적함량,결과표명,대부분전기인청호중청호소적함량고우대조식주,기중,전기인청호중청호소함량최고약위대조적2.4배.해연구증명과량표체cyp71avl화cpr기인시제고청호중청호소함량적유효방법.
