CAJ | 학술논문

为有效防治鸭肝炎,建立特异性强、敏感性高、简便快速的DHV检测方法,对分离的DHV进行纯化,并制备单克隆抗体.鸭胚尿囊液中的DHV经冻融、氯仿反复处理、PEG浓缩和超速离心纯化后,免疫BALB/c小鼠,用杂交瘤技术,通过间接ELISA法筛选及多次亚克隆,成功获得8株阳性杂交瘤细胞,分别命名为DHV-1、DHV-6、DHV-7、DHV-8、DHV-9、DHV-10、DHV-11和DHV-12,并制备出腹水.8株单抗腹水经ELISA法检测,DHV-7、DHV-8的效价为1:2 000;DHV-6、DHV-10的效价为1:8000;DHV-1、DHV-9、DHV-11和DHV-12的效价为(1:32000)～(1:512000).抗体亚类鉴定,DHV-6、DHV-7、DHV-8、DHV-10为IgG1;DHV-1、DHV-12为IgG2a;DHV-2、DHV-9、DHV-11为IgG2b.上述抗体均为k链.特异性鉴定表明,上述单克隆抗体只能与从尿囊液中纯化的DHV病毒包板反应,与非DHV抗原无反应.鸭胚中和试验及雏鸭保护试验结果表明,DHV-6、DHV-7、DHV-9、DHV-10具有较好的中和活性,并对雏鸭有不同程度的保护作用.
위유효방치압간염,건립특이성강、민감성고、간편쾌속적DHV검측방법,대분리적DHV진행순화,병제비단극륭항체.압배뇨낭액중적DHV경동융、록방반복처리、PEG농축화초속리심순화후,면역BALB/c소서,용잡교류기술,통과간접ELISA법사선급다차아극륭,성공획득8주양성잡교류세포,분별명명위DHV-1、DHV-6、DHV-7、DHV-8、DHV-9、DHV-10、DHV-11화DHV-12,병제비출복수.8주단항복수경ELISA법검측,DHV-7、DHV-8적효개위1:2 000;DHV-6、DHV-10적효개위1:8000;DHV-1、DHV-9、DHV-11화DHV-12적효개위(1:32000)～(1:512000).항체아류감정,DHV-6、DHV-7、DHV-8、DHV-10위IgG1;DHV-1、DHV-12위IgG2a;DHV-2、DHV-9、DHV-11위IgG2b.상술항체균위k련.특이성감정표명,상술단극륭항체지능여종뇨낭액중순화적DHV병독포판반응,여비DHV항원무반응.압배중화시험급추압보호시험결과표명,DHV-6、DHV-7、DHV-9、DHV-10구유교호적중화활성,병대추압유불동정도적보호작용.