CAJ | 학술논문

目的:通过热激活启动子条件性过表达鼠源性MYCN基因,建立生殖系稳定转染的斑马鱼系.以研究MYCN基因对造血调控因子转录的影响.方法:构建携绿色荧光蛋白"报告基因"的MYCN质粒.显微注射到斑马鱼胚胎单细胞期,通过荧光筛选出FO代,继而建立生殖系稳定转染的转基因鱼系.通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、实时荧光定量PCR(real-time fluorogentic quantitative PCR,RFQ-PCR)血涂片论证MYCN基因的过表达及其对造血调控因子的影响.结果:在256条嵌合表达的性成熟阳代斑马鱼中,鉴定发现有18条(7.0%)1显示转基因阳性,其中雄鱼8条,雌鱼10条.同时,RFQ-PCR及外周血涂片均显示,转基因斑马鱼F1和F2代均发生明显的造血分化障碍,造血关键调控因子scl、mpo、gatal基因表达量明显下降.结论:斑马鱼在基因研究中具有直观及规模化优势.特别适用于单一基因的研究,MYCN基因产物可显著抑制红系生成和造血分化.
목적:통과열격활계동자조건성과표체서원성MYCN기인,건립생식계은정전염적반마어계.이연구MYCN기인대조혈조공인자전록적영향.방법:구건휴록색형광단백"보고기인"적MYCN질립.현미주사도반마어배태단세포기,통과형광사선출FO대,계이건립생식계은정전염적전기인어계.통과반전록취합매련반응(RT-PCR)、실시형광정량PCR(real-time fluorogentic quantitative PCR,RFQ-PCR)혈도편론증MYCN기인적과표체급기대조혈조공인자적영향.결과:재256조감합표체적성성숙양대반마어중,감정발현유18조(7.0%)1현시전기인양성,기중웅어8조,자어10조.동시,RFQ-PCR급외주혈도편균현시,전기인반마어F1화F2대균발생명현적조혈분화장애,조혈관건조공인자scl、mpo、gatal기인표체량명현하강.결론:반마어재기인연구중구유직관급규모화우세.특별괄용우단일기인적연구,MYCN기인산물가현저억제홍계생성화조혈분화.