西北农业学报
西北農業學報
서북농업학보
ACTA AGRICULTURAE BOREALI-OCCIDENTALIS SINICA
2011年
7期
17-21
,共5页
猪传染性胃肠炎病毒%S基因%克隆%序列分析
豬傳染性胃腸炎病毒%S基因%剋隆%序列分析
저전염성위장염병독%S기인%극륭%서렬분석
根据GenBank公布的猪传染性胃肠炎病毒S基因的序列,设计合成1对特异性引物,通过RT-PCR从用细胞增殖的TGEV病毒液中扩增编码S基因B、C抗原位点的基因片段,然后将获得的片段克隆至pMD18-T载体上,构建重组质粒.通过PCR、酶切和测序鉴定重组质粒,将测序结果与GenBank公布的21个相关序列进行多序列比较并绘制进化树.所克隆的TGEV陕西分离株S基因B、C抗原位点基因片段长度为765 bp,与参考毒株的核苷酸同源性为96.1%～99.9%.进化树分析表明,分离株与中国的H株、HN2002株、TS株,美国的Miller M60株、Miller M6株及英国的FS772株亲缘关系较近,与H株的亲缘关系最近.
根據GenBank公佈的豬傳染性胃腸炎病毒S基因的序列,設計閤成1對特異性引物,通過RT-PCR從用細胞增殖的TGEV病毒液中擴增編碼S基因B、C抗原位點的基因片段,然後將穫得的片段剋隆至pMD18-T載體上,構建重組質粒.通過PCR、酶切和測序鑒定重組質粒,將測序結果與GenBank公佈的21箇相關序列進行多序列比較併繪製進化樹.所剋隆的TGEV陝西分離株S基因B、C抗原位點基因片段長度為765 bp,與參攷毒株的覈苷痠同源性為96.1%～99.9%.進化樹分析錶明,分離株與中國的H株、HN2002株、TS株,美國的Miller M60株、Miller M6株及英國的FS772株親緣關繫較近,與H株的親緣關繫最近.
근거GenBank공포적저전염성위장염병독S기인적서렬,설계합성1대특이성인물,통과RT-PCR종용세포증식적TGEV병독액중확증편마S기인B、C항원위점적기인편단,연후장획득적편단극륭지pMD18-T재체상,구건중조질립.통과PCR、매절화측서감정중조질립,장측서결과여GenBank공포적21개상관서렬진행다서렬비교병회제진화수.소극륭적TGEV협서분리주S기인B、C항원위점기인편단장도위765 bp,여삼고독주적핵감산동원성위96.1%～99.9%.진화수분석표명,분리주여중국적H주、HN2002주、TS주,미국적Miller M60주、Miller M6주급영국적FS772주친연관계교근,여H주적친연관계최근.
