免疫PCR检测微量H5亚型禽流感病毒
면역PCR검측미량H5아형금류감병독
Immuno-PCR Assay for Detection of H5 Hemagglutinin Subtype Avian Influenza Virus
  • 万方数据
    畜牧兽医学报 축목수의학보

    2011年 7期 1039-1045 ,共7页

    邓明俊%肖西志%吴振兴%张彦明%辛学谦%郑小龙%王群%王昌军

    산명준%초서지%오진흥%장언명%신학겸%정소룡%왕군%왕창군

    免疫PCR%禽流感病毒%H5血凝素蛋白 免疫PCR%禽流感病毒%H5血凝素蛋白
    면역PCR%금류감병독%H5혈응소단백
    为了有效检测低浓度禽流感病毒,笔者通过将高特异性的抗原-抗体反应与高灵敏性的PCR扩增技术相结合,建立了一种快速检测痕量H5亚型禽流感病毒的间接免疫PCR方法和间接“三明治”抗体夹心免疫PCR方法.以TopYield 96孔板为固相免疫吸附载体,以禽流感病毒H5蛋白为检测对象,通过一系列免疫反应及亲和素-生物素桥联作用,将生物素标记的报告DNA分子和生物素标记的禽流感病毒H5亚型抗体分子连接.充分洗涤后,在TopYield板孔中添加PCR反应液,对板壁偶联的报告DNA进行PCR扩增,间接达到检测微量禽流感病毒H5蛋白的目标.通过优化报告DNA分子和链亲和素的浓度,2种免疫PCR技术都可检测到约1 fg的禽流感病毒H5蛋白,与常规ELISA方法相比,灵敏性提高了近1 000倍.
    위료유효검측저농도금류감병독,필자통과장고특이성적항원-항체반응여고령민성적PCR확증기술상결합,건립료일충쾌속검측흔량H5아형금류감병독적간접면역PCR방법화간접“삼명치”항체협심면역PCR방법.이TopYield 96공판위고상면역흡부재체,이금류감병독H5단백위검측대상,통과일계렬면역반응급친화소-생물소교련작용,장생물소표기적보고DNA분자화생물소표기적금류감병독H5아형항체분자련접.충분세조후,재TopYield판공중첨가PCR반응액,대판벽우련적보고DNA진행PCR확증,간접체도검측미량금류감병독H5단백적목표.통과우화보고DNA분자화련친화소적농도,2충면역PCR기술도가검측도약1 fg적금류감병독H5단백,여상규ELISA방법상비,령민성제고료근1 000배.
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