实验生物学报
實驗生物學報
실험생물학보
ACTA BIOLOGIAE EXPERIMENTLIS SINICA
2002年
2期
89-97
,共9页
黄哲平%柯碧霞%王健%申庆祥
黃哲平%柯碧霞%王健%申慶祥
황철평%가벽하%왕건%신경상
单克隆非特异性抑制因子-β%表达%抗体制备%组织定位
單剋隆非特異性抑製因子-β%錶達%抗體製備%組織定位
단극륭비특이성억제인자-β%표체%항체제비%조직정위
为了获得足够量的单克隆非特异性抑制因子-β蛋白(monoclonal nonspecific supressor factor β,MNSFβ)及其抗体用于探讨MNSFβ在着床中的作用机理,本研究构建了表达质粒pBV220/MNSFβ-hCGβ,在大肠杆菌中表达了融合蛋白MNSFβ-hCGβ,用抗hCGβ抗体对表达产物进行鉴定,结果表明融合蛋白MNSFβ-hCGβ得到了正确表达,且分子量和理论值相近.表达产物MNSFβ-hCGβ经初步纯化后用于免疫Balb/C小鼠,制备抗体.同时,我们还构建了表达质粒pGEX-4T-2/MNSFβ,在大肠杆菌中表达了融合蛋白GST-MNSFβ.用融合蛋白GST-MNSFβ对融合前的免疫小鼠回忆刺激并进行检测,制备了抗MNSFβ多克隆抗体和单克隆抗体.应用所制备的多克隆抗体进行免疫组化研究,对MNSFβ在小鼠子宫内膜上进行了组织定位,结果显示,MNSFβ在着床日(受精后第4.5天)小鼠子宫非着床位点的表达和着床位点相比明显提高.
為瞭穫得足夠量的單剋隆非特異性抑製因子-β蛋白(monoclonal nonspecific supressor factor β,MNSFβ)及其抗體用于探討MNSFβ在著床中的作用機理,本研究構建瞭錶達質粒pBV220/MNSFβ-hCGβ,在大腸桿菌中錶達瞭融閤蛋白MNSFβ-hCGβ,用抗hCGβ抗體對錶達產物進行鑒定,結果錶明融閤蛋白MNSFβ-hCGβ得到瞭正確錶達,且分子量和理論值相近.錶達產物MNSFβ-hCGβ經初步純化後用于免疫Balb/C小鼠,製備抗體.同時,我們還構建瞭錶達質粒pGEX-4T-2/MNSFβ,在大腸桿菌中錶達瞭融閤蛋白GST-MNSFβ.用融閤蛋白GST-MNSFβ對融閤前的免疫小鼠迴憶刺激併進行檢測,製備瞭抗MNSFβ多剋隆抗體和單剋隆抗體.應用所製備的多剋隆抗體進行免疫組化研究,對MNSFβ在小鼠子宮內膜上進行瞭組織定位,結果顯示,MNSFβ在著床日(受精後第4.5天)小鼠子宮非著床位點的錶達和著床位點相比明顯提高.
위료획득족구량적단극륭비특이성억제인자-β단백(monoclonal nonspecific supressor factor β,MNSFβ)급기항체용우탐토MNSFβ재착상중적작용궤리,본연구구건료표체질립pBV220/MNSFβ-hCGβ,재대장간균중표체료융합단백MNSFβ-hCGβ,용항hCGβ항체대표체산물진행감정,결과표명융합단백MNSFβ-hCGβ득도료정학표체,차분자량화이론치상근.표체산물MNSFβ-hCGβ경초보순화후용우면역Balb/C소서,제비항체.동시,아문환구건료표체질립pGEX-4T-2/MNSFβ,재대장간균중표체료융합단백GST-MNSFβ.용융합단백GST-MNSFβ대융합전적면역소서회억자격병진행검측,제비료항MNSFβ다극륭항체화단극륭항체.응용소제비적다극륭항체진행면역조화연구,대MNSFβ재소서자궁내막상진행료조직정위,결과현시,MNSFβ재착상일(수정후제4.5천)소서자궁비착상위점적표체화착상위점상비명현제고.
