中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2003年
1期
40-43
,共4页
陈守义%阮承迈%李军涛%马永红%李鹏%张玉静
陳守義%阮承邁%李軍濤%馬永紅%李鵬%張玉靜
진수의%원승매%리군도%마영홍%리붕%장옥정
端粒相关序列%克隆%鸡
耑粒相關序列%剋隆%鷄
단립상관서렬%극륭%계
根据真核细胞端粒DNA序列的共同特点,设计了一条引物(TELO02)(24nt).按照TaKala克隆试剂盒的介绍方法,染色体基因组DNA经HaeⅢ和HinfⅠ两种限制性内切酶酶切后,先进行初级PCR(C1和TELO02)02)扩增,得到的产物为模板再经过次级PCR(C2和TELO2)扩增,得到的产物用试剂盒回收,并连接到PMD-18-T载体上,转化到JM109受体菌中.从阳性克隆中提取质粒DNA进行PCR和酶切鉴定,确认后进行序列测定,获得了一段243sbp的鸡端粒相关序列.此序列与人第7条染色体基因组末端序列的同源性为63.5%;与鼠端粒旁序列同源性为63.2%;而与MDV基因组序列的BamHⅠ酶切片段76.6%同源.
根據真覈細胞耑粒DNA序列的共同特點,設計瞭一條引物(TELO02)(24nt).按照TaKala剋隆試劑盒的介紹方法,染色體基因組DNA經HaeⅢ和HinfⅠ兩種限製性內切酶酶切後,先進行初級PCR(C1和TELO02)02)擴增,得到的產物為模闆再經過次級PCR(C2和TELO2)擴增,得到的產物用試劑盒迴收,併連接到PMD-18-T載體上,轉化到JM109受體菌中.從暘性剋隆中提取質粒DNA進行PCR和酶切鑒定,確認後進行序列測定,穫得瞭一段243sbp的鷄耑粒相關序列.此序列與人第7條染色體基因組末耑序列的同源性為63.5%;與鼠耑粒徬序列同源性為63.2%;而與MDV基因組序列的BamHⅠ酶切片段76.6%同源.
근거진핵세포단립DNA서렬적공동특점,설계료일조인물(TELO02)(24nt).안조TaKala극륭시제합적개소방법,염색체기인조DNA경HaeⅢ화HinfⅠ량충한제성내절매매절후,선진행초급PCR(C1화TELO02)02)확증,득도적산물위모판재경과차급PCR(C2화TELO2)확증,득도적산물용시제합회수,병련접도PMD-18-T재체상,전화도JM109수체균중.종양성극륭중제취질립DNA진행PCR화매절감정,학인후진행서렬측정,획득료일단243sbp적계단립상관서렬.차서렬여인제7조염색체기인조말단서렬적동원성위63.5%;여서단립방서렬동원성위63.2%;이여MDV기인조서렬적BamHⅠ매절편단76.6%동원.
