军事医学科学院院刊
軍事醫學科學院院刊
군사의학과학원원간
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2004年
5期
433-436
,共4页
白秉学%徐东刚%王金凤%彭善云%邹民吉%范明
白秉學%徐東剛%王金鳳%彭善雲%鄒民吉%範明
백병학%서동강%왕금봉%팽선운%추민길%범명
角质细胞生长因子%相互作用蛋白%酵母双杂交%PRO2605蛋白
角質細胞生長因子%相互作用蛋白%酵母雙雜交%PRO2605蛋白
각질세포생장인자%상호작용단백%효모쌍잡교%PRO2605단백
目的:利用酵母双杂交系统筛选KGF-2的相互作用蛋白,为阐明其分子作用机制提供有益线索.方法:通过聚合酶链反应从人胎肝cDNA文库中钓取KGF-2 cDNA,构建诱饵蛋白载体pAS2-1-KGF-2,并对其自身转录激活活性进行鉴定,利用酵母双杂交系统筛选人胎肝cDNA文库,挑选双阳性克隆.将KGF-2和候选蛋白分别克隆至哺乳动物细胞双杂交的BD、AD质粒中,共同转染COS-7细胞,通过CAT分析验证KGF-2和候选蛋白之间的相互作用.结果:VDNA序列分析和同源检索显示所获候选蛋白为PRO2605.以KGF-2和PRO2605 cDNA共转化酵母宿主Y190后可激活报道基因,但共转染COS-7细胞后,CAT分析结果阴性.结论:KGF-2和PRO2605在酵母体内存在相互作用,但在COS-7细胞中未能检测到两者的相互作用.
目的:利用酵母雙雜交繫統篩選KGF-2的相互作用蛋白,為闡明其分子作用機製提供有益線索.方法:通過聚閤酶鏈反應從人胎肝cDNA文庫中釣取KGF-2 cDNA,構建誘餌蛋白載體pAS2-1-KGF-2,併對其自身轉錄激活活性進行鑒定,利用酵母雙雜交繫統篩選人胎肝cDNA文庫,挑選雙暘性剋隆.將KGF-2和候選蛋白分彆剋隆至哺乳動物細胞雙雜交的BD、AD質粒中,共同轉染COS-7細胞,通過CAT分析驗證KGF-2和候選蛋白之間的相互作用.結果:VDNA序列分析和同源檢索顯示所穫候選蛋白為PRO2605.以KGF-2和PRO2605 cDNA共轉化酵母宿主Y190後可激活報道基因,但共轉染COS-7細胞後,CAT分析結果陰性.結論:KGF-2和PRO2605在酵母體內存在相互作用,但在COS-7細胞中未能檢測到兩者的相互作用.
목적:이용효모쌍잡교계통사선KGF-2적상호작용단백,위천명기분자작용궤제제공유익선색.방법:통과취합매련반응종인태간cDNA문고중조취KGF-2 cDNA,구건유이단백재체pAS2-1-KGF-2,병대기자신전록격활활성진행감정,이용효모쌍잡교계통사선인태간cDNA문고,도선쌍양성극륭.장KGF-2화후선단백분별극륭지포유동물세포쌍잡교적BD、AD질립중,공동전염COS-7세포,통과CAT분석험증KGF-2화후선단백지간적상호작용.결과:VDNA서렬분석화동원검색현시소획후선단백위PRO2605.이KGF-2화PRO2605 cDNA공전화효모숙주Y190후가격활보도기인,단공전염COS-7세포후,CAT분석결과음성.결론:KGF-2화PRO2605재효모체내존재상호작용,단재COS-7세포중미능검측도량자적상호작용.
