中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2004年
5期
335-337
,共3页
杨丽琛%张素香%皮国华%朱祯%杨晓光
楊麗琛%張素香%皮國華%硃禎%楊曉光
양려침%장소향%피국화%주정%양효광
HPT%单克隆抗体%鉴定
HPT%單剋隆抗體%鑒定
HPT%단극륭항체%감정
目的:制备抗潮霉素B磷酸转移酶(HPT)的单克隆抗体(McAb),建立一种快速检测转基因作物中该选择标记基因HPT编码蛋白的方法.方法:用基因重组潮霉素B磷酸转移酶(HPT)抗原免疫BALB/C小鼠,采用杂交瘤技术制备McAb.选择不同的抗原决定簇与兔抗HPT多抗配对,建立双抗夹心ELISA检测HPT抗原.结果:筛选出四株稳定分泌抗HPT单抗的杂交瘤细胞株,IgG亚类鉴定均为IgG1,ELISA检测证实单抗可特异性识别细胞培养上清、重组子菌体裂解产物中及纯化出的HPT蛋白.结合位点测定实验表明4株单抗是针对不同的抗原决定簇,与多克隆抗体组成双抗夹心ELISA法,均可较好地检测到HPT抗原.检测的灵敏度为30 ng/ml,且与别的无关抗原无交叉反应性.结论:4株杂交瘤细胞株特异性好,亲和力强,组成双抗夹心ELISA法可用于快速、灵敏检测HPT抗原.
目的:製備抗潮黴素B燐痠轉移酶(HPT)的單剋隆抗體(McAb),建立一種快速檢測轉基因作物中該選擇標記基因HPT編碼蛋白的方法.方法:用基因重組潮黴素B燐痠轉移酶(HPT)抗原免疫BALB/C小鼠,採用雜交瘤技術製備McAb.選擇不同的抗原決定簇與兔抗HPT多抗配對,建立雙抗夾心ELISA檢測HPT抗原.結果:篩選齣四株穩定分泌抗HPT單抗的雜交瘤細胞株,IgG亞類鑒定均為IgG1,ELISA檢測證實單抗可特異性識彆細胞培養上清、重組子菌體裂解產物中及純化齣的HPT蛋白.結閤位點測定實驗錶明4株單抗是針對不同的抗原決定簇,與多剋隆抗體組成雙抗夾心ELISA法,均可較好地檢測到HPT抗原.檢測的靈敏度為30 ng/ml,且與彆的無關抗原無交扠反應性.結論:4株雜交瘤細胞株特異性好,親和力彊,組成雙抗夾心ELISA法可用于快速、靈敏檢測HPT抗原.
목적:제비항조매소B린산전이매(HPT)적단극륭항체(McAb),건립일충쾌속검측전기인작물중해선택표기기인HPT편마단백적방법.방법:용기인중조조매소B린산전이매(HPT)항원면역BALB/C소서,채용잡교류기술제비McAb.선택불동적항원결정족여토항HPT다항배대,건립쌍항협심ELISA검측HPT항원.결과:사선출사주은정분비항HPT단항적잡교류세포주,IgG아류감정균위IgG1,ELISA검측증실단항가특이성식별세포배양상청、중조자균체렬해산물중급순화출적HPT단백.결합위점측정실험표명4주단항시침대불동적항원결정족,여다극륭항체조성쌍항협심ELISA법,균가교호지검측도HPT항원.검측적령민도위30 ng/ml,차여별적무관항원무교차반응성.결론:4주잡교류세포주특이성호,친화력강,조성쌍항협심ELISA법가용우쾌속、령민검측HPT항원.
