西北农林科技大学学报(自然科学版)
西北農林科技大學學報(自然科學版)
서북농림과기대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF NORTHWEST SCI-TECH UNIVERSITY OF AGRICULTURE AND FORESTRY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2006年
5期
147-152
,共6页
榕属植物%DNA提取%RAPD%体系优化
榕屬植物%DNA提取%RAPD%體繫優化
용속식물%DNA제취%RAPD%체계우화
以桑科榕属植物为研究对象,利用改进的CTAB法提取基因组DNA,并通过单因素多水平梯度试验,筛选了模板、Mg2+、Taq酶、dNTPs和随机引物的浓度及用量,建立了榕属植物RAPD技术分析体系.反应体系总体积为25μL,各组分浓度为:10×Buffer 2.5 μL,Mg2+2.5 mmol/L,Taq DNA polymerase 0.06 U/μL,dNTPs0.2 mmol/L,Primer 0.2 μmol/L,Template DNA 1.2 ng/μL.PCR循环程序为:94 ℃预变性4 min;94 ℃循环变性1 min,36 ℃退火1 min,72 ℃延伸2 min,40个循环;最后72 ℃延伸8 min.
以桑科榕屬植物為研究對象,利用改進的CTAB法提取基因組DNA,併通過單因素多水平梯度試驗,篩選瞭模闆、Mg2+、Taq酶、dNTPs和隨機引物的濃度及用量,建立瞭榕屬植物RAPD技術分析體繫.反應體繫總體積為25μL,各組分濃度為:10×Buffer 2.5 μL,Mg2+2.5 mmol/L,Taq DNA polymerase 0.06 U/μL,dNTPs0.2 mmol/L,Primer 0.2 μmol/L,Template DNA 1.2 ng/μL.PCR循環程序為:94 ℃預變性4 min;94 ℃循環變性1 min,36 ℃退火1 min,72 ℃延伸2 min,40箇循環;最後72 ℃延伸8 min.
이상과용속식물위연구대상,이용개진적CTAB법제취기인조DNA,병통과단인소다수평제도시험,사선료모판、Mg2+、Taq매、dNTPs화수궤인물적농도급용량,건립료용속식물RAPD기술분석체계.반응체계총체적위25μL,각조분농도위:10×Buffer 2.5 μL,Mg2+2.5 mmol/L,Taq DNA polymerase 0.06 U/μL,dNTPs0.2 mmol/L,Primer 0.2 μmol/L,Template DNA 1.2 ng/μL.PCR순배정서위:94 ℃예변성4 min;94 ℃순배변성1 min,36 ℃퇴화1 min,72 ℃연신2 min,40개순배;최후72 ℃연신8 min.