中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2008年
3期
212-215
,共4页
张超范%刘长明%危艳武%刘霓虹
張超範%劉長明%危豔武%劉霓虹
장초범%류장명%위염무%류예홍
猪伪狂犬病病毒%强毒株%分离%鉴定
豬偽狂犬病病毒%彊毒株%分離%鑒定
저위광견병병독%강독주%분리%감정
从临床疑似猪伪狂犬病发病仔猪的脑组织病料中,经聚合酶链式反应(PCR)证实为猪伪狂犬病病毒(PRV)野毒感染,采用无PCV1污染的猪肾细胞系(PK-15)分离培养,经蚀斑克隆纯化,培育1株细胞培养适应毒.命名为PRV-JF株.该分离株经细胞培养传代,能够产生典型的细胞病变,病毒滴度随代次显著增加,第24代毒价达108.5-TCID50/mL.免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)检测病毒抗原分布在细胞核及细胞质内.病毒感染细胞可被已知PRV阳性血清中和.电镜负染观察到病毒粒子呈椭圆或圆形外观,无囊膜的病毒粒子直径约110nm~150nm,有囊膜的成熟病毒粒子直径约15nm~180nm.PCR鉴定该毒株含有班基因,其序列与GenBank登录的7株PRV同源性为97.7%~100%.用不同剂量病毒培养物接种家兔于24 h~72 h内全部死亡.研究表明,PRV-JF分离株对易感动物具有高致病性,为进一步开展该病毒流行病学、致病机理、疫苗免疫与诊断研究奠定了基础.
從臨床疑似豬偽狂犬病髮病仔豬的腦組織病料中,經聚閤酶鏈式反應(PCR)證實為豬偽狂犬病病毒(PRV)野毒感染,採用無PCV1汙染的豬腎細胞繫(PK-15)分離培養,經蝕斑剋隆純化,培育1株細胞培養適應毒.命名為PRV-JF株.該分離株經細胞培養傳代,能夠產生典型的細胞病變,病毒滴度隨代次顯著增加,第24代毒價達108.5-TCID50/mL.免疫過氧化物酶單層細胞試驗(IPMA)檢測病毒抗原分佈在細胞覈及細胞質內.病毒感染細胞可被已知PRV暘性血清中和.電鏡負染觀察到病毒粒子呈橢圓或圓形外觀,無囊膜的病毒粒子直徑約110nm~150nm,有囊膜的成熟病毒粒子直徑約15nm~180nm.PCR鑒定該毒株含有班基因,其序列與GenBank登錄的7株PRV同源性為97.7%~100%.用不同劑量病毒培養物接種傢兔于24 h~72 h內全部死亡.研究錶明,PRV-JF分離株對易感動物具有高緻病性,為進一步開展該病毒流行病學、緻病機理、疫苗免疫與診斷研究奠定瞭基礎.
종림상의사저위광견병발병자저적뇌조직병료중,경취합매련식반응(PCR)증실위저위광견병병독(PRV)야독감염,채용무PCV1오염적저신세포계(PK-15)분리배양,경식반극륭순화,배육1주세포배양괄응독.명명위PRV-JF주.해분리주경세포배양전대,능구산생전형적세포병변,병독적도수대차현저증가,제24대독개체108.5-TCID50/mL.면역과양화물매단층세포시험(IPMA)검측병독항원분포재세포핵급세포질내.병독감염세포가피이지PRV양성혈청중화.전경부염관찰도병독입자정타원혹원형외관,무낭막적병독입자직경약110nm~150nm,유낭막적성숙병독입자직경약15nm~180nm.PCR감정해독주함유반기인,기서렬여GenBank등록적7주PRV동원성위97.7%~100%.용불동제량병독배양물접충가토우24 h~72 h내전부사망.연구표명,PRV-JF분리주대역감동물구유고치병성,위진일보개전해병독류행병학、치병궤리、역묘면역여진단연구전정료기출.