武汉大学学报（理学版）
武漢大學學報（理學版）
무한대학학보（이학판）
JOURNAL OF WUHAN UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2008年
4期
479-484
,共6页
细胞质雄性不育%线粒体%BAC文库%PCR筛选
細胞質雄性不育%線粒體%BAC文庫%PCR篩選
세포질웅성불육%선립체%BAC문고%PCR사선
以云南紫稻细胞质无花粉型水稻樱香不育系和保持系为材料,构建了不育系和保持系的线粒体基因组BAC文库.每个文库均保存2 304个菌落,外源插入片段介于10～20 kb之间.将两个文库的2 304个克隆分别集中于96孔板中,根据已发表的水稻线粒体序列对atp6、atp9、cob、cox2等4个基因设计特定引物,对96孔板中的菌落进行了PCR鉴定,均能筛选得到阳性克隆,通过对96孔板中阳性克隆的位置进行推导,可以得到文库中含有相应基因克隆的大致位置及数目.PCR筛选结果显示两个文库均包含用于检测的目的线粒体基因,说明文库典型性良好,并且PCR法用于文库基因筛选具有快速简便的优点.
以雲南紫稻細胞質無花粉型水稻櫻香不育繫和保持繫為材料,構建瞭不育繫和保持繫的線粒體基因組BAC文庫.每箇文庫均保存2 304箇菌落,外源插入片段介于10～20 kb之間.將兩箇文庫的2 304箇剋隆分彆集中于96孔闆中,根據已髮錶的水稻線粒體序列對atp6、atp9、cob、cox2等4箇基因設計特定引物,對96孔闆中的菌落進行瞭PCR鑒定,均能篩選得到暘性剋隆,通過對96孔闆中暘性剋隆的位置進行推導,可以得到文庫中含有相應基因剋隆的大緻位置及數目.PCR篩選結果顯示兩箇文庫均包含用于檢測的目的線粒體基因,說明文庫典型性良好,併且PCR法用于文庫基因篩選具有快速簡便的優點.
이운남자도세포질무화분형수도앵향불육계화보지계위재료,구건료불육계화보지계적선립체기인조BAC문고.매개문고균보존2 304개균락,외원삽입편단개우10～20 kb지간.장량개문고적2 304개극륭분별집중우96공판중,근거이발표적수도선립체서렬대atp6、atp9、cob、cox2등4개기인설계특정인물,대96공판중적균락진행료PCR감정,균능사선득도양성극륭,통과대96공판중양성극륭적위치진행추도,가이득도문고중함유상응기인극륭적대치위치급수목.PCR사선결과현시량개문고균포함용우검측적목적선립체기인,설명문고전형성량호,병차PCR법용우문고기인사선구유쾌속간편적우점.
