胃肠病学
胃腸病學
위장병학
CHINESE JOURNAL OF GASTROENTEROLOGY
2011年
7期
429-431
,共3页
张健锋%印红军%张弘%朱惠君%毛振彪
張健鋒%印紅軍%張弘%硃惠君%毛振彪
장건봉%인홍군%장홍%주혜군%모진표
鸟苷酸环化酶%RNA干扰%胃肿瘤
鳥苷痠環化酶%RNA榦擾%胃腫瘤
조감산배화매%RNA간우%위종류
背景:正常胃黏膜组织不表达肠上皮细胞特异性受体鸟苷酸环化酶C(GC-C),但肠化生、异型增生和胃腺癌组织存在G,C-C异位表达.目的:筛选并建立GC-C特异性短发夹RNA(shRNA)稳定转染的胃腺癌细胞株.方法:构建靶向GC-C基因的shRNA表达载体,以脂质体法转染胃腺癌细胞株SGC-7901,实时荧光定量RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测GC-CmRNA和蛋白表达.G418筛选阳性克隆并建立GC-CshRNA稳定转染的SGC-7901细胞株,并行RT-PCR鉴定.结果:GC-C shRNA可抑制SGC-7901细胞株的GC-C基因表达,以GC-Csh3的抑制效果最佳,转染48 h后的GC-CmRNA和蛋白沉默率分别为77.0％和62.2％.有效筛选并建立了GC-CshRNA稳定转染的SGC-7901细胞株,GC-CmRNA沉默率为65.3％.结论:成功建立了GC-C shRNA稳定转染的SGC-7901细胞株,为下一步研究奠定了基础.
揹景:正常胃黏膜組織不錶達腸上皮細胞特異性受體鳥苷痠環化酶C(GC-C),但腸化生、異型增生和胃腺癌組織存在G,C-C異位錶達.目的:篩選併建立GC-C特異性短髮夾RNA(shRNA)穩定轉染的胃腺癌細胞株.方法:構建靶嚮GC-C基因的shRNA錶達載體,以脂質體法轉染胃腺癌細胞株SGC-7901,實時熒光定量RT-PCR和蛋白質印跡法分彆檢測GC-CmRNA和蛋白錶達.G418篩選暘性剋隆併建立GC-CshRNA穩定轉染的SGC-7901細胞株,併行RT-PCR鑒定.結果:GC-C shRNA可抑製SGC-7901細胞株的GC-C基因錶達,以GC-Csh3的抑製效果最佳,轉染48 h後的GC-CmRNA和蛋白沉默率分彆為77.0％和62.2％.有效篩選併建立瞭GC-CshRNA穩定轉染的SGC-7901細胞株,GC-CmRNA沉默率為65.3％.結論:成功建立瞭GC-C shRNA穩定轉染的SGC-7901細胞株,為下一步研究奠定瞭基礎.
배경:정상위점막조직불표체장상피세포특이성수체조감산배화매C(GC-C),단장화생、이형증생화위선암조직존재G,C-C이위표체.목적:사선병건립GC-C특이성단발협RNA(shRNA)은정전염적위선암세포주.방법:구건파향GC-C기인적shRNA표체재체,이지질체법전염위선암세포주SGC-7901,실시형광정량RT-PCR화단백질인적법분별검측GC-CmRNA화단백표체.G418사선양성극륭병건립GC-CshRNA은정전염적SGC-7901세포주,병행RT-PCR감정.결과:GC-C shRNA가억제SGC-7901세포주적GC-C기인표체,이GC-Csh3적억제효과최가,전염48 h후적GC-CmRNA화단백침묵솔분별위77.0％화62.2％.유효사선병건립료GC-CshRNA은정전염적SGC-7901세포주,GC-CmRNA침묵솔위65.3％.결론:성공건립료GC-C shRNA은정전염적SGC-7901세포주,위하일보연구전정료기출.
