热带作物学报
熱帶作物學報
열대작물학보
CHINESE JOURNAL OF TROPICAL CROPS
2012年
3期
540-544
,共5页
梁昌镛%赵淑玲%侯艳玲%戴雪娟
樑昌鏞%趙淑玲%侯豔玲%戴雪娟
량창용%조숙령%후염령%대설연
水稻条纹病毒%Pc2%cDNA文库%酵母双杂交筛选%诱饵质粒
水稻條紋病毒%Pc2%cDNA文庫%酵母雙雜交篩選%誘餌質粒
수도조문병독%Pc2%cDNA문고%효모쌍잡교사선%유이질립
水稻条纹病毒编码的Pc2蛋白在病毒侵染及宿主症状发生中起作用.研究其与寄主间的分子互作有助于揭示病毒侵染与致病的分子机制.分别将编码Pc2 N端(Pc2-N)与Pc2 C端(Pc2-C)的基因片段克隆到酵母双杂交诱饵载体pGBKT7上,并构建水稻叶片cDNA文库,然后分别用Pc2-N和Pc2-C为诱饵筛选文库寻找与其互作的寄主因子.结果表明,诱饵载体中插入的Pc2-N和Pc2-C编码框和氨基酸序列均正确.Pc2-N对酵母菌株AH109无毒性和自主激活能力,但Pc2-C对酵母具有细胞毒性.文库滴度为4×107 CFU/mL,且大多数插入片段在500～2 000 bp之间.利用Pc2-N为诱饵筛选水稻cDNA文库,获得有8个候选阳性克隆.经序列测定和BLAST分析结果表明,这些克隆共编码5种蛋白,主要为胁迫相关蛋白与光系统相关蛋白.
水稻條紋病毒編碼的Pc2蛋白在病毒侵染及宿主癥狀髮生中起作用.研究其與寄主間的分子互作有助于揭示病毒侵染與緻病的分子機製.分彆將編碼Pc2 N耑(Pc2-N)與Pc2 C耑(Pc2-C)的基因片段剋隆到酵母雙雜交誘餌載體pGBKT7上,併構建水稻葉片cDNA文庫,然後分彆用Pc2-N和Pc2-C為誘餌篩選文庫尋找與其互作的寄主因子.結果錶明,誘餌載體中插入的Pc2-N和Pc2-C編碼框和氨基痠序列均正確.Pc2-N對酵母菌株AH109無毒性和自主激活能力,但Pc2-C對酵母具有細胞毒性.文庫滴度為4×107 CFU/mL,且大多數插入片段在500～2 000 bp之間.利用Pc2-N為誘餌篩選水稻cDNA文庫,穫得有8箇候選暘性剋隆.經序列測定和BLAST分析結果錶明,這些剋隆共編碼5種蛋白,主要為脅迫相關蛋白與光繫統相關蛋白.
수도조문병독편마적Pc2단백재병독침염급숙주증상발생중기작용.연구기여기주간적분자호작유조우게시병독침염여치병적분자궤제.분별장편마Pc2 N단(Pc2-N)여Pc2 C단(Pc2-C)적기인편단극륭도효모쌍잡교유이재체pGBKT7상,병구건수도협편cDNA문고,연후분별용Pc2-N화Pc2-C위유이사선문고심조여기호작적기주인자.결과표명,유이재체중삽입적Pc2-N화Pc2-C편마광화안기산서렬균정학.Pc2-N대효모균주AH109무독성화자주격활능력,단Pc2-C대효모구유세포독성.문고적도위4×107 CFU/mL,차대다수삽입편단재500～2 000 bp지간.이용Pc2-N위유이사선수도cDNA문고,획득유8개후선양성극륭.경서렬측정화BLAST분석결과표명,저사극륭공편마5충단백,주요위협박상관단백여광계통상관단백.
