中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2012年
5期
402-406
,共5页
成凤%匡文斌%王秦%秦晓林%范晓卿%董晋豫%梁勤东%李朴%涂植光
成鳳%劻文斌%王秦%秦曉林%範曉卿%董晉豫%樑勤東%李樸%塗植光
성봉%광문빈%왕진%진효림%범효경%동진예%량근동%리박%도식광
白介素12%转化生长因子%细胞增殖%肝癌细胞
白介素12%轉化生長因子%細胞增殖%肝癌細胞
백개소12%전화생장인자%세포증식%간암세포
目的 构建携带人IL-12的重组腺病毒,观察其对Hep3B增殖及TGF-β表达的影响.方法 PCR扩增IL-12基因,构建穿梭质粒pAdTrack-IL-12;穿梭质粒经Pme I线性化后转化AdEasier Cell,E.coli BJ5183内同源重组;PacⅠ 酶切重组腺病毒质粒,转染AD293,包装病毒;病毒pAd-IL-12感染肝癌细胞Hep3B,以RT-PCR、Western blot检测白介素12的表达;MTT法检测肝癌细胞的增殖情况;RT-PCR检测转化生长因子-β(TGF-β)的表达.结果 成功构建携IL-12基因的重组质粒,并成功包装可高效感染Hep3B的腺病毒pAd-IL-12;RT-PCR以及Western blot结果表明,病毒pAd-IL-12感染Hep3B后可高表达白介素12,并且与对照组相比Hep3B增殖能力显著降低(P＜0.05),TGF-β表达量也降低(P＜0.05).结论 可高表达IL-12的腺病毒包装成功,感染肝癌细胞Hep3B后抑制其增殖,同时也下调TGF-β的表达,为进一步研究IL-12的肿瘤治疗作用奠定了基础.
目的 構建攜帶人IL-12的重組腺病毒,觀察其對Hep3B增殖及TGF-β錶達的影響.方法 PCR擴增IL-12基因,構建穿梭質粒pAdTrack-IL-12;穿梭質粒經Pme I線性化後轉化AdEasier Cell,E.coli BJ5183內同源重組;PacⅠ 酶切重組腺病毒質粒,轉染AD293,包裝病毒;病毒pAd-IL-12感染肝癌細胞Hep3B,以RT-PCR、Western blot檢測白介素12的錶達;MTT法檢測肝癌細胞的增殖情況;RT-PCR檢測轉化生長因子-β(TGF-β)的錶達.結果 成功構建攜IL-12基因的重組質粒,併成功包裝可高效感染Hep3B的腺病毒pAd-IL-12;RT-PCR以及Western blot結果錶明,病毒pAd-IL-12感染Hep3B後可高錶達白介素12,併且與對照組相比Hep3B增殖能力顯著降低(P＜0.05),TGF-β錶達量也降低(P＜0.05).結論 可高錶達IL-12的腺病毒包裝成功,感染肝癌細胞Hep3B後抑製其增殖,同時也下調TGF-β的錶達,為進一步研究IL-12的腫瘤治療作用奠定瞭基礎.
목적 구건휴대인IL-12적중조선병독,관찰기대Hep3B증식급TGF-β표체적영향.방법 PCR확증IL-12기인,구건천사질립pAdTrack-IL-12;천사질립경Pme I선성화후전화AdEasier Cell,E.coli BJ5183내동원중조;PacⅠ 매절중조선병독질립,전염AD293,포장병독;병독pAd-IL-12감염간암세포Hep3B,이RT-PCR、Western blot검측백개소12적표체;MTT법검측간암세포적증식정황;RT-PCR검측전화생장인자-β(TGF-β)적표체.결과 성공구건휴IL-12기인적중조질립,병성공포장가고효감염Hep3B적선병독pAd-IL-12;RT-PCR이급Western blot결과표명,병독pAd-IL-12감염Hep3B후가고표체백개소12,병차여대조조상비Hep3B증식능력현저강저(P＜0.05),TGF-β표체량야강저(P＜0.05).결론 가고표체IL-12적선병독포장성공,감염간암세포Hep3B후억제기증식,동시야하조TGF-β적표체,위진일보연구IL-12적종류치료작용전정료기출.
