应用与环境生物学报
應用與環境生物學報
응용여배경생물학보
CHINESE JOURNAL OF APPLIED & ENVIRONMENTAL BIOLOGY
2002年
5期
528-531
,共4页
莫志伟%张燕%张紫莱%李永兴%李久蒂
莫誌偉%張燕%張紫萊%李永興%李久蒂
막지위%장연%장자래%리영흥%리구체
parDE%质粒稳定性%玉米联合固氮菌
parDE%質粒穩定性%玉米聯閤固氮菌
parDE%질립은정성%옥미연합고담균
将parDE基因克隆到载有组成型表达nifA基因的质粒pST1021上,得到重组质粒pLM2.将pLM2,pST1021分别转到玉米联合固氮菌Enteorbacter gergoviae 57-7(E57-7),获得转化子E57-7(pLM2),E57-7(pST1021),二者在c(NH+4)=50 mmol L-1的Kp培养基中表达的固氮活性一致.将pLM2,pST1021分别转到E.coli DH5α(pMGFP2.1),培养物用488 nm光激发后在510 nm均有相同的的荧光特征发射峰. 上述实验表明,重组质粒pLM2仍保留了原质粒pST1021中nifA的功能.但质粒pLM2和pST1021在E57-7中的稳定性试验表明,E57-7(pST1021)在无抗生素的LB中继代培养70代后,质粒几乎全部丢失(仅存1%);而E57-7(pLM2)继代培养100代后,质粒全部存在(100%). 图4 表1 参12
將parDE基因剋隆到載有組成型錶達nifA基因的質粒pST1021上,得到重組質粒pLM2.將pLM2,pST1021分彆轉到玉米聯閤固氮菌Enteorbacter gergoviae 57-7(E57-7),穫得轉化子E57-7(pLM2),E57-7(pST1021),二者在c(NH+4)=50 mmol L-1的Kp培養基中錶達的固氮活性一緻.將pLM2,pST1021分彆轉到E.coli DH5α(pMGFP2.1),培養物用488 nm光激髮後在510 nm均有相同的的熒光特徵髮射峰. 上述實驗錶明,重組質粒pLM2仍保留瞭原質粒pST1021中nifA的功能.但質粒pLM2和pST1021在E57-7中的穩定性試驗錶明,E57-7(pST1021)在無抗生素的LB中繼代培養70代後,質粒幾乎全部丟失(僅存1%);而E57-7(pLM2)繼代培養100代後,質粒全部存在(100%). 圖4 錶1 參12
장parDE기인극륭도재유조성형표체nifA기인적질립pST1021상,득도중조질립pLM2.장pLM2,pST1021분별전도옥미연합고담균Enteorbacter gergoviae 57-7(E57-7),획득전화자E57-7(pLM2),E57-7(pST1021),이자재c(NH+4)=50 mmol L-1적Kp배양기중표체적고담활성일치.장pLM2,pST1021분별전도E.coli DH5α(pMGFP2.1),배양물용488 nm광격발후재510 nm균유상동적적형광특정발사봉. 상술실험표명,중조질립pLM2잉보류료원질립pST1021중nifA적공능.단질립pLM2화pST1021재E57-7중적은정성시험표명,E57-7(pST1021)재무항생소적LB중계대배양70대후,질립궤호전부주실(부존1%);이E57-7(pLM2)계대배양100대후,질립전부존재(100%). 도4 표1 삼12