热带医学杂志
熱帶醫學雜誌
열대의학잡지
JOURNAL OF TROPICAL MEDICINE
2006年
3期
263-266
,共4页
杜贻鹏%陈展辉%陈淑杰%何霞%柏云%谢金卫%周俊宜
杜貽鵬%陳展輝%陳淑傑%何霞%柏雲%謝金衛%週俊宜
두이붕%진전휘%진숙걸%하하%백운%사금위%주준의
hTERT%TEP1%端粒酶%视网膜血管内皮细胞
hTERT%TEP1%耑粒酶%視網膜血管內皮細胞
hTERT%TEP1%단립매%시망막혈관내피세포
目的探讨外源性人端粒酶催化亚单位(hTERT)对人视网膜血管内皮细胞(hRCEC)端粒酶活性、相关基因表达和体外生存时间的影响.方法阳离子脂质体介导hRCEC转染;RT-PCR法检测人类端粒酶RNA组份(hTR)、端粒酶相关蛋白1(TEP1)及hTERT基因的表达;TRAP法检测端粒酶活性;细胞计数法绘制生长曲线.结果hTR、TEP1基因在hTERT转染hRCEC前后都表达,hTERT基因在转染前不表达,转染后24 h及稳定转染克隆形成时表达,细胞停止分裂时又失去表达;转染前无端粒酶活性,转染后24h及稳定转染克隆形成时可检测到端粒酶活性,细胞停止分裂时端粒酶活性消失;稳定转染了hTERT基因后hRCEC的生存时间没有延长.结论hTERT转染可显著提高hRCEC中hTERT基因表达水平,hTERT基因表达与端粒酶活性一致,但只用hTERT转染的方法不能使hRCEC细胞生存时间延长.
目的探討外源性人耑粒酶催化亞單位(hTERT)對人視網膜血管內皮細胞(hRCEC)耑粒酶活性、相關基因錶達和體外生存時間的影響.方法暘離子脂質體介導hRCEC轉染;RT-PCR法檢測人類耑粒酶RNA組份(hTR)、耑粒酶相關蛋白1(TEP1)及hTERT基因的錶達;TRAP法檢測耑粒酶活性;細胞計數法繪製生長麯線.結果hTR、TEP1基因在hTERT轉染hRCEC前後都錶達,hTERT基因在轉染前不錶達,轉染後24 h及穩定轉染剋隆形成時錶達,細胞停止分裂時又失去錶達;轉染前無耑粒酶活性,轉染後24h及穩定轉染剋隆形成時可檢測到耑粒酶活性,細胞停止分裂時耑粒酶活性消失;穩定轉染瞭hTERT基因後hRCEC的生存時間沒有延長.結論hTERT轉染可顯著提高hRCEC中hTERT基因錶達水平,hTERT基因錶達與耑粒酶活性一緻,但隻用hTERT轉染的方法不能使hRCEC細胞生存時間延長.
목적탐토외원성인단립매최화아단위(hTERT)대인시망막혈관내피세포(hRCEC)단립매활성、상관기인표체화체외생존시간적영향.방법양리자지질체개도hRCEC전염;RT-PCR법검측인류단립매RNA조빈(hTR)、단립매상관단백1(TEP1)급hTERT기인적표체;TRAP법검측단립매활성;세포계수법회제생장곡선.결과hTR、TEP1기인재hTERT전염hRCEC전후도표체,hTERT기인재전염전불표체,전염후24 h급은정전염극륭형성시표체,세포정지분렬시우실거표체;전염전무단립매활성,전염후24h급은정전염극륭형성시가검측도단립매활성,세포정지분렬시단립매활성소실;은정전염료hTERT기인후hRCEC적생존시간몰유연장.결론hTERT전염가현저제고hRCEC중hTERT기인표체수평,hTERT기인표체여단립매활성일치,단지용hTERT전염적방법불능사hRCEC세포생존시간연장.
