CAJ | 학술논문

目的: 构建针对血管内皮生长因子受体Ⅱ(VEGFR2),又称激酶功能区受体(KDR)的pSilencerTM3.1 siRNA(small interfering RNA)表达载体,并在前列腺癌细胞PC3中观察其干扰效果. 方法: 设计针对KDR基因编码区的寡核苷酸链,体外退火后克隆入经BamH Ⅰ, HindⅢ双酶切线性化的干扰载体pSilencerTM3.1-H1 neo中,对重组质粒进行酶切分析和DNA系列测定. 以脂质体法将pSilencerTM3.1-H1 neo空载体和3个(pSilencer3.1-KDR1, pSilencer3.1-KDR2和pSilencer3.1-KDR3)重组质粒分别导人PC3前列腺癌细胞系. 72 h后用RT-PCR和Western blotting技术检测各实验组前列腺癌细胞内KDR mRNA及蛋白水平的表达情况. 结果: 经酶切鉴定及DNA测序,重组质粒中已插入了目的基因片断. 转染KDR-siRNA的前列腺癌细胞,72 h后,而以pSilencer3.1-KDR3的抑制KDR mRNA及蛋白表达效果最为有效,其抑制率约为55%. 结论: 成功构建了针对KDR的RNA干扰表达载体pSilencer3.1-KDR1, pSilencer3.1-KDR2和pSilencer3.1-KDR3, pSilencer3.1-KDR3能有效抑制KDR在前列腺癌细胞中表达,为将其进一步应用于前列腺癌的治疗研究奠定了基础.
목적: 구건침대혈관내피생장인자수체Ⅱ(VEGFR2),우칭격매공능구수체(KDR)적pSilencerTM3.1 siRNA(small interfering RNA)표체재체,병재전렬선암세포PC3중관찰기간우효과. 방법: 설계침대KDR기인편마구적과핵감산련,체외퇴화후극륭입경BamH Ⅰ, HindⅢ쌍매절선성화적간우재체pSilencerTM3.1-H1 neo중,대중조질립진행매절분석화DNA계렬측정. 이지질체법장pSilencerTM3.1-H1 neo공재체화3개(pSilencer3.1-KDR1, pSilencer3.1-KDR2화pSilencer3.1-KDR3)중조질립분별도인PC3전렬선암세포계. 72 h후용RT-PCR화Western blotting기술검측각실험조전렬선암세포내KDR mRNA급단백수평적표체정황. 결과: 경매절감정급DNA측서,중조질립중이삽입료목적기인편단. 전염KDR-siRNA적전렬선암세포,72 h후,이이pSilencer3.1-KDR3적억제KDR mRNA급단백표체효과최위유효,기억제솔약위55%. 결론: 성공구건료침대KDR적RNA간우표체재체pSilencer3.1-KDR1, pSilencer3.1-KDR2화pSilencer3.1-KDR3, pSilencer3.1-KDR3능유효억제KDR재전렬선암세포중표체,위장기진일보응용우전렬선암적치료연구전정료기출.