CAJ | 학술논문

目的:对铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)的LexA蛋白进行表达、纯化,并检测其免疫活性.方法: lexA基因片段插入表达载体pET32a(+),在E.coli BL21(DE3)中表达.包涵体经洗涤并用8mol/L尿素溶解,镍离子亲合柱层析为第一步纯化,Superdex75凝胶过滤层析作为第二步精细纯化,HPLC测定蛋白的浓度,将纯化的LexA蛋白经注射途径免疫家兔,制备兔抗LexA血清,采用免疫双扩、ELISA及Western blot分析LexA的免疫活性.结果:LexA以包涵体形式表达,经镍离子亲合柱层析和凝胶过滤层析二步组合纯化目的蛋白,经HPLC测定目的蛋白的最终纯度为98.97%,表达及纯化的LexA具有良好的免疫活性.
목적:대동록가단포균(Pseudomonas aeruginosa,PA)적LexA단백진행표체、순화,병검측기면역활성.방법: lexA기인편단삽입표체재체pET32a(+),재E.coli BL21(DE3)중표체.포함체경세조병용8mol/L뇨소용해,얼리자친합주층석위제일보순화,Superdex75응효과려층석작위제이보정세순화,HPLC측정단백적농도,장순화적LexA단백경주사도경면역가토,제비토항LexA혈청,채용면역쌍확、ELISA급Western blot분석LexA적면역활성.결과:LexA이포함체형식표체,경얼리자친합주층석화응효과려층석이보조합순화목적단백,경HPLC측정목적단백적최종순도위98.97%,표체급순화적LexA구유량호적면역활성.