藻酸钠凝胶三维培养条件下胰岛素样生长因子Ⅰ对兔关节软骨细胞表型的影响
조산납응효삼유배양조건하이도소양생장인자Ⅰ대토관절연골세포표형적영향
Influence of insulin-like growth factor-Ⅰ on the phenotype of three dimensional cultured articular chondrocytes in rabbits
  • 万方数据
    中国组织工程研究与临床康复 중국조직공정연구여림상강복
    JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
    2007年 19期 3704-3707 ,共4页

    吴剑宏%王秋根%张秋林%唐昊%汤旭日%汪方%邓迎生%谢杨%官正茂%王谦%杨常委

    오검굉%왕추근%장추림%당호%탕욱일%왕방%산영생%사양%관정무%왕겸%양상위

    胰岛素样生长因子Ⅰ%关节%软骨细胞%细胞培养%藻酸盐%组织构建 胰島素樣生長因子Ⅰ%關節%軟骨細胞%細胞培養%藻痠鹽%組織構建
    이도소양생장인자Ⅰ%관절%연골세포%세포배양%조산염%조직구건
    目的:观察胰岛素样生长因子Ⅰ对藻酸盐凝胶三维培养条件下兔关节软骨细胞表型的影响.方法:实验于2004-10/2006-10在上海长海医院血管外科实验室完成.实验材料:4周龄雄性新西兰兔6只.实验方法:利用机械与酶消化的方法获得均一的兔关节软骨细胞,在单层培养条件下将软骨细胞增殖至P2代:将P2代细胞高密度条件下转入藻酸盐凝胶培养介质,进行三维培养.细胞培养分组:①不含胰岛素样生长因子Ⅰ三维培养.②含50μg/L胰岛素样生长因子Ⅰ三维培养组.③单层培养.实验评估:①三维培养细胞于培养的2,4,6周行冰冻切片苏木精-伊红染色及Ⅱ型胶原免疫组织化学检测.②单层培养细胞每传代1次行细胞爬片苏木精-伊红染色及Ⅱ型胶原免疫组织化学检测.结果:①细胞学外观形态变化:两组藻酸盐凝胶三维培养体系中的软骨细胞在6周的培养过程中始终保持了圆形的细胞外观.单层培养软骨细胞在第5代以前,均保持了星形及多角形的正常软骨细胞外观.②免疫组织化学显示结果:培养6周后,含胰岛素样生长因子Ⅰ三维培养软骨细胞特异性Ⅱ型胶原细胞仍呈强阳性染色,表达水平较转入三维体系前未见降低,培养细胞保持了良好的分化表型.单层培养软骨细胞在第5代以前,Ⅱ型胶原免疫组织化学染色为阳性.第6代以后,大部分细胞呈梭形,向成纤维细胞转化,Ⅱ型胶原免疫组织化学染色为阴性.结论:胰岛素样生长因子Ⅰ对藻酸盐三维培养条件下的关节软骨细胞表型具有维持作用.
    목적:관찰이도소양생장인자Ⅰ대조산염응효삼유배양조건하토관절연골세포표형적영향.방법:실험우2004-10/2006-10재상해장해의원혈관외과실험실완성.실험재료:4주령웅성신서란토6지.실험방법:이용궤계여매소화적방법획득균일적토관절연골세포,재단층배양조건하장연골세포증식지P2대:장P2대세포고밀도조건하전입조산염응효배양개질,진행삼유배양.세포배양분조:①불함이도소양생장인자Ⅰ삼유배양.②함50μg/L이도소양생장인자Ⅰ삼유배양조.③단층배양.실험평고:①삼유배양세포우배양적2,4,6주행빙동절편소목정-이홍염색급Ⅱ형효원면역조직화학검측.②단층배양세포매전대1차행세포파편소목정-이홍염색급Ⅱ형효원면역조직화학검측.결과:①세포학외관형태변화:량조조산염응효삼유배양체계중적연골세포재6주적배양과정중시종보지료원형적세포외관.단층배양연골세포재제5대이전,균보지료성형급다각형적정상연골세포외관.②면역조직화학현시결과:배양6주후,함이도소양생장인자Ⅰ삼유배양연골세포특이성Ⅱ형효원세포잉정강양성염색,표체수평교전입삼유체계전미견강저,배양세포보지료량호적분화표형.단층배양연골세포재제5대이전,Ⅱ형효원면역조직화학염색위양성.제6대이후,대부분세포정사형,향성섬유세포전화,Ⅱ형효원면역조직화학염색위음성.결론:이도소양생장인자Ⅰ대조산염삼유배양조건하적관절연골세포표형구유유지작용.
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