吉林大学学报（医学版）
吉林大學學報（醫學版）
길림대학학보（의학판）
JOURNAL OF JILIN UNIVERSITY(MEDICINE EDITION)
2007年
5期
834-836
,共3页
人细胞分裂周期基因2%基因克隆%原核表达
人細胞分裂週期基因2%基因剋隆%原覈錶達
인세포분렬주기기인2%기인극륭%원핵표체
目的:从人肝癌组织中克隆出人细胞分裂周期基因2( CDC2),并在大肠杆菌中表达CDC2蛋白.方法:从人肝癌组织中提取RNA,采用RT-PCR法扩增CDC2 cDNA,用DNA凝胶回收试剂盒纯化并回收RT-PCR产物,将RT-PCR产物插入pET28a(+)载体NdeⅠ和 XhoⅠ两酶切位点之间,转化大肠杆菌BL21(DE3);IPTG诱导表达人CDC2蛋白.结果:RT-PCR扩增出约894 bp的DNA片段,与GenBank中的CDC2基因序列完全一致.经限制性内切图谱和测序鉴定,成功构建了pET28a(+)/CDC2原核表达载体.SDS-PAGE分析结果显示人CDC2蛋白在大肠杆菌中得已表达.结论:从人肝癌组织中成功地扩增出CDC2基因,并在大肠杆菌中表达.
目的:從人肝癌組織中剋隆齣人細胞分裂週期基因2( CDC2),併在大腸桿菌中錶達CDC2蛋白.方法:從人肝癌組織中提取RNA,採用RT-PCR法擴增CDC2 cDNA,用DNA凝膠迴收試劑盒純化併迴收RT-PCR產物,將RT-PCR產物插入pET28a(+)載體NdeⅠ和 XhoⅠ兩酶切位點之間,轉化大腸桿菌BL21(DE3);IPTG誘導錶達人CDC2蛋白.結果:RT-PCR擴增齣約894 bp的DNA片段,與GenBank中的CDC2基因序列完全一緻.經限製性內切圖譜和測序鑒定,成功構建瞭pET28a(+)/CDC2原覈錶達載體.SDS-PAGE分析結果顯示人CDC2蛋白在大腸桿菌中得已錶達.結論:從人肝癌組織中成功地擴增齣CDC2基因,併在大腸桿菌中錶達.
목적:종인간암조직중극륭출인세포분렬주기기인2( CDC2),병재대장간균중표체CDC2단백.방법:종인간암조직중제취RNA,채용RT-PCR법확증CDC2 cDNA,용DNA응효회수시제합순화병회수RT-PCR산물,장RT-PCR산물삽입pET28a(+)재체NdeⅠ화 XhoⅠ량매절위점지간,전화대장간균BL21(DE3);IPTG유도표체인CDC2단백.결과:RT-PCR확증출약894 bp적DNA편단,여GenBank중적CDC2기인서렬완전일치.경한제성내절도보화측서감정,성공구건료pET28a(+)/CDC2원핵표체재체.SDS-PAGE분석결과현시인CDC2단백재대장간균중득이표체.결론:종인간암조직중성공지확증출CDC2기인,병재대장간균중표체.
