医学分子生物学杂志
醫學分子生物學雜誌
의학분자생물학잡지
FOREIGN MEDICAL SCIENCES
2011年
2期
118-122
,共5页
叶曦%伍小春%李国伟%罗炜%王团老
葉晞%伍小春%李國偉%囉煒%王糰老
협희%오소춘%리국위%라위%왕단로
巴尔通体%巴尔通体表面蛋白%基因表达与调控
巴爾通體%巴爾通體錶麵蛋白%基因錶達與調控
파이통체%파이통체표면단백%기인표체여조공
目的 构建巴尔通体表面蛋白p26基因的原核重组表达载体,表达和纯化重组表达蛋白P26,并鉴定其抗原性.方法 利用PCR方法从巴尔通体B.tribocorum厦门分离株的基因组DNA中扩增出p26蛋白基因,并将该基因的编码区克隆到pGEX-4T-1表达载体中,从而构建GST-p26融合蛋白原核重组表达载体.将表达载体转化大肠埃希菌(E.coli DH5α),诱导表达GST-p26,并运用亲和层析技术纯化蛋白.通过蛋白质斑点印迹试验和间接ELISA法检验GST-p26是否具有抗原性.结果 成功构建了p26的原核表达载体,该表达载体可在E.coli DH5α中大量表达GST-p26,原核表达的GST-p26能够与感染动物血液样本发生特异性免疫反应.结论 原核重组表达的GST-p26可作为潜在的抗原,应用于巴尔通体的血清学检测.
目的 構建巴爾通體錶麵蛋白p26基因的原覈重組錶達載體,錶達和純化重組錶達蛋白P26,併鑒定其抗原性.方法 利用PCR方法從巴爾通體B.tribocorum廈門分離株的基因組DNA中擴增齣p26蛋白基因,併將該基因的編碼區剋隆到pGEX-4T-1錶達載體中,從而構建GST-p26融閤蛋白原覈重組錶達載體.將錶達載體轉化大腸埃希菌(E.coli DH5α),誘導錶達GST-p26,併運用親和層析技術純化蛋白.通過蛋白質斑點印跡試驗和間接ELISA法檢驗GST-p26是否具有抗原性.結果 成功構建瞭p26的原覈錶達載體,該錶達載體可在E.coli DH5α中大量錶達GST-p26,原覈錶達的GST-p26能夠與感染動物血液樣本髮生特異性免疫反應.結論 原覈重組錶達的GST-p26可作為潛在的抗原,應用于巴爾通體的血清學檢測.
목적 구건파이통체표면단백p26기인적원핵중조표체재체,표체화순화중조표체단백P26,병감정기항원성.방법 이용PCR방법종파이통체B.tribocorum하문분리주적기인조DNA중확증출p26단백기인,병장해기인적편마구극륭도pGEX-4T-1표체재체중,종이구건GST-p26융합단백원핵중조표체재체.장표체재체전화대장애희균(E.coli DH5α),유도표체GST-p26,병운용친화층석기술순화단백.통과단백질반점인적시험화간접ELISA법검험GST-p26시부구유항원성.결과 성공구건료p26적원핵표체재체,해표체재체가재E.coli DH5α중대량표체GST-p26,원핵표체적GST-p26능구여감염동물혈액양본발생특이성면역반응.결론 원핵중조표체적GST-p26가작위잠재적항원,응용우파이통체적혈청학검측.
