中国医学科学院学报
中國醫學科學院學報
중국의학과학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE SINICAE
2011年
3期
306-312,后插1-后插2
,共8页
翟羽佳%陈嘉%仉红刚%张静%张秋菊%修瑞娟
翟羽佳%陳嘉%仉紅剛%張靜%張鞦菊%脩瑞娟
적우가%진가%장홍강%장정%장추국%수서연
N-(6-氨乙基)-5-氯-1-萘磺酰胺%人脂肪间充质干细胞%内皮细胞%诱导分化
N-(6-氨乙基)-5-氯-1-萘磺酰胺%人脂肪間充質榦細胞%內皮細胞%誘導分化
N-(6-안을기)-5-록-1-내광선알%인지방간충질간세포%내피세포%유도분화
目的 研究N-(6-氨乙基)-5-氯-1-萘磺酰胺(W7)在体外对人脂肪间充质干细胞(hADSCs)转分化为内皮细胞(EC)的影响.方法 以含40 ng/ml血管内皮生长因子(VEGF)和l0ng/ml碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的干细胞无血清分化培养基进行细胞培养,分为空白对照组(不含W7的分化培养基)和高(30 μmol/L)、中(20μ-mol/L)、低(10μmol/L)剂量W7组.hADSCs加药8 d后,采用流式细胞术(FCM)检测各组EC von Willebrand 因子(vWF)和血管选择性钙黏素(VE-Cadherin)表型变化,激光共聚焦显微镜检测钙荧光探针(Fluo-3)标记的细胞内[Ca2+];变化;同时将W7处理后的hADSCs种植在Matrigel胶上,观察细胞成血管能力;采用Western blot技术分析不同浓度药物处理8 d后细胞外调节激酶(ERK)和磷酸化ERK(p-ERK)变化.结果 分化至8 d时,与空白对照组相比,hADSCs转分化后的细胞VE-Cadherin和vWF表达量随W7浓度降低而显著上升(P＜0.01),胞质[Ca2+];显著升高(P＜0.01).W7干预组的培养细胞均有管腔样血管结构形成,空白对照组的细胞无血管管型形成.与空白对照组相比,不同剂量W7干预组间细胞的ERK表达水平差异无统计学意义(P＞0.05);随着W7浓度的降低,p-ERK表达水平明显升高(P＜0.05).结论 适当浓度的W7可促进hADSC向EC诱导分化,其机制可能与促进细胞内[Ca2+];增加,激活细胞分化过程中的ERK/MAPK信号通路有关.
目的 研究N-(6-氨乙基)-5-氯-1-萘磺酰胺(W7)在體外對人脂肪間充質榦細胞(hADSCs)轉分化為內皮細胞(EC)的影響.方法 以含40 ng/ml血管內皮生長因子(VEGF)和l0ng/ml堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)的榦細胞無血清分化培養基進行細胞培養,分為空白對照組(不含W7的分化培養基)和高(30 μmol/L)、中(20μ-mol/L)、低(10μmol/L)劑量W7組.hADSCs加藥8 d後,採用流式細胞術(FCM)檢測各組EC von Willebrand 因子(vWF)和血管選擇性鈣黏素(VE-Cadherin)錶型變化,激光共聚焦顯微鏡檢測鈣熒光探針(Fluo-3)標記的細胞內[Ca2+];變化;同時將W7處理後的hADSCs種植在Matrigel膠上,觀察細胞成血管能力;採用Western blot技術分析不同濃度藥物處理8 d後細胞外調節激酶(ERK)和燐痠化ERK(p-ERK)變化.結果 分化至8 d時,與空白對照組相比,hADSCs轉分化後的細胞VE-Cadherin和vWF錶達量隨W7濃度降低而顯著上升(P＜0.01),胞質[Ca2+];顯著升高(P＜0.01).W7榦預組的培養細胞均有管腔樣血管結構形成,空白對照組的細胞無血管管型形成.與空白對照組相比,不同劑量W7榦預組間細胞的ERK錶達水平差異無統計學意義(P＞0.05);隨著W7濃度的降低,p-ERK錶達水平明顯升高(P＜0.05).結論 適噹濃度的W7可促進hADSC嚮EC誘導分化,其機製可能與促進細胞內[Ca2+];增加,激活細胞分化過程中的ERK/MAPK信號通路有關.
목적 연구N-(6-안을기)-5-록-1-내광선알(W7)재체외대인지방간충질간세포(hADSCs)전분화위내피세포(EC)적영향.방법 이함40 ng/ml혈관내피생장인자(VEGF)화l0ng/ml감성성섬유세포생장인자(bFGF)적간세포무혈청분화배양기진행세포배양,분위공백대조조(불함W7적분화배양기)화고(30 μmol/L)、중(20μ-mol/L)、저(10μmol/L)제량W7조.hADSCs가약8 d후,채용류식세포술(FCM)검측각조EC von Willebrand 인자(vWF)화혈관선택성개점소(VE-Cadherin)표형변화,격광공취초현미경검측개형광탐침(Fluo-3)표기적세포내[Ca2+];변화;동시장W7처리후적hADSCs충식재Matrigel효상,관찰세포성혈관능력;채용Western blot기술분석불동농도약물처리8 d후세포외조절격매(ERK)화린산화ERK(p-ERK)변화.결과 분화지8 d시,여공백대조조상비,hADSCs전분화후적세포VE-Cadherin화vWF표체량수W7농도강저이현저상승(P＜0.01),포질[Ca2+];현저승고(P＜0.01).W7간예조적배양세포균유관강양혈관결구형성,공백대조조적세포무혈관관형형성.여공백대조조상비,불동제량W7간예조간세포적ERK표체수평차이무통계학의의(P＞0.05);수착W7농도적강저,p-ERK표체수평명현승고(P＜0.05).결론 괄당농도적W7가촉진hADSC향EC유도분화,기궤제가능여촉진세포내[Ca2+];증가,격활세포분화과정중적ERK/MAPK신호통로유관.
