浙江大学学报(医学版)
浙江大學學報(醫學版)
절강대학학보(의학판)
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY MEDICAL SCIENCES
2011年
5期
467-474
,共8页
曹伟杰%刘丽珍%来晓瑜%王冲%于晓虹%黄河
曹偉傑%劉麗珍%來曉瑜%王遲%于曉虹%黃河
조위걸%류려진%래효유%왕충%우효홍%황하
霉酚酸/药理学%间质干细胞/细胞学%次黄嘌呤类%成骨细胞/细胞学%细胞分化/药物作用%细胞增殖/药物作用%鸟嘌呤核苷酸类
黴酚痠/藥理學%間質榦細胞/細胞學%次黃嘌呤類%成骨細胞/細胞學%細胞分化/藥物作用%細胞增殖/藥物作用%鳥嘌呤覈苷痠類
매분산/약이학%간질간세포/세포학%차황표령류%성골세포/세포학%세포분화/약물작용%세포증식/약물작용%조표령핵감산류
目的:研究霉酚酸( mycophenolic acid,MPA)对人骨髓来源的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的作用及其机制.方法:在MSCs生长和分化过程中加入不同浓度的MPA,用CCK-8方法分析MSCs增殖的情况,用Annexin V/PI双染色法检测MPA各浓度组的细胞凋亡,RT-PCR方法分析MSCs次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(IMPDH)的表达;应用von Kossa染色、钙定量和real-time PCR方法分析MPA对MSCs成骨分化的影响.结果:1~100 μmol/L的MPA呈时间浓度依赖性地抑制间充质干细胞的生长,添加鸟嘌呤核苷可以解除该抑制效应,且该抑制效应与细胞凋亡无关;RT-PCR结果显示,MSCs表达IMPDH I和IMPDH Ⅱ两种亚型;yon Kossa染色和钙定量显示,MPA抑制MSCs的成骨分化,Osteopontin和BMP-2的表达相应减低;进一步研究发现,MPA可能通过影响转录因子Runx2、Osterix的表达而影响MSCs的成骨分化.结论:MPA通过耗竭鸟嘌呤核苷的方式呈时间浓度依赖性抑制人骨髓来源的间充质干细胞的增殖;同时,MPA通过抑制Runx2和Osterix蛋白的表达,抑制MSCs的成骨分化.
目的:研究黴酚痠( mycophenolic acid,MPA)對人骨髓來源的間充質榦細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的作用及其機製.方法:在MSCs生長和分化過程中加入不同濃度的MPA,用CCK-8方法分析MSCs增殖的情況,用Annexin V/PI雙染色法檢測MPA各濃度組的細胞凋亡,RT-PCR方法分析MSCs次黃嘌呤覈苷痠脫氫酶(IMPDH)的錶達;應用von Kossa染色、鈣定量和real-time PCR方法分析MPA對MSCs成骨分化的影響.結果:1~100 μmol/L的MPA呈時間濃度依賴性地抑製間充質榦細胞的生長,添加鳥嘌呤覈苷可以解除該抑製效應,且該抑製效應與細胞凋亡無關;RT-PCR結果顯示,MSCs錶達IMPDH I和IMPDH Ⅱ兩種亞型;yon Kossa染色和鈣定量顯示,MPA抑製MSCs的成骨分化,Osteopontin和BMP-2的錶達相應減低;進一步研究髮現,MPA可能通過影響轉錄因子Runx2、Osterix的錶達而影響MSCs的成骨分化.結論:MPA通過耗竭鳥嘌呤覈苷的方式呈時間濃度依賴性抑製人骨髓來源的間充質榦細胞的增殖;同時,MPA通過抑製Runx2和Osterix蛋白的錶達,抑製MSCs的成骨分化.
목적:연구매분산( mycophenolic acid,MPA)대인골수래원적간충질간세포(mesenchymal stem cells,MSCs)적작용급기궤제.방법:재MSCs생장화분화과정중가입불동농도적MPA,용CCK-8방법분석MSCs증식적정황,용Annexin V/PI쌍염색법검측MPA각농도조적세포조망,RT-PCR방법분석MSCs차황표령핵감산탈경매(IMPDH)적표체;응용von Kossa염색、개정량화real-time PCR방법분석MPA대MSCs성골분화적영향.결과:1~100 μmol/L적MPA정시간농도의뢰성지억제간충질간세포적생장,첨가조표령핵감가이해제해억제효응,차해억제효응여세포조망무관;RT-PCR결과현시,MSCs표체IMPDH I화IMPDH Ⅱ량충아형;yon Kossa염색화개정량현시,MPA억제MSCs적성골분화,Osteopontin화BMP-2적표체상응감저;진일보연구발현,MPA가능통과영향전록인자Runx2、Osterix적표체이영향MSCs적성골분화.결론:MPA통과모갈조표령핵감적방식정시간농도의뢰성억제인골수래원적간충질간세포적증식;동시,MPA통과억제Runx2화Osterix단백적표체,억제MSCs적성골분화.