CAJ | 학술논문

采用双水相分配法和离心法对水稻叶片的细胞质膜进行了纯化.选用聚合物Dextran T 500/ PEG 3350质量分数分别为6.1％、6.2％、6.3％、6.4％、6.5％的双水相体系,对3次分配后的细胞质膜纯化效果进行了研究,并进行了细胞质膜标志酶H+ -ATPase的活性测定、柠檬酸铅-醋酸铀双染色及电镜检测.结果表明:聚合物质量分数为6.3％的双水相体系可以获得高纯度的质膜微囊,且随分配次数的增加,可以有效减少其他内膜的污染,其质膜标志酶VO3-4 -ATPase的相对活性高达93.5％.粗质膜经过3次两相分配后的蛋白质产率为2.73％.非离子型去垢剂Brij 58对质膜H+-ATPase的活性变化影响结果表明,纯化的质膜微囊封闭性较好,主要为正向型质膜微囊.质膜蛋白质经增溶缓冲液溶解及1-D SDS-PAGE的结果表明,纯化后的质膜有效减少了特定蛋白质条带的丰度,使蛋白质条带的分布更为均匀.双向电泳结果表明,纯化后的质膜双向电脉图谱具有低背景、高分辨率和重复性的优点,为进一步的水稻质膜蛋白质组研究提供了可靠的试验材料.
채용쌍수상분배법화리심법대수도협편적세포질막진행료순화.선용취합물Dextran T 500/ PEG 3350질량분수분별위6.1％、6.2％、6.3％、6.4％、6.5％적쌍수상체계,대3차분배후적세포질막순화효과진행료연구,병진행료세포질막표지매H+ -ATPase적활성측정、저몽산연-작산유쌍염색급전경검측.결과표명:취합물질량분수위6.3％적쌍수상체계가이획득고순도적질막미낭,차수분배차수적증가,가이유효감소기타내막적오염,기질막표지매VO3-4 -ATPase적상대활성고체93.5％.조질막경과3차량상분배후적단백질산솔위2.73％.비리자형거구제Brij 58대질막H+-ATPase적활성변화영향결과표명,순화적질막미낭봉폐성교호,주요위정향형질막미낭.질막단백질경증용완충액용해급1-D SDS-PAGE적결과표명,순화후적질막유효감소료특정단백질조대적봉도,사단백질조대적분포경위균균.쌍향전영결과표명,순화후적질막쌍향전맥도보구유저배경、고분변솔화중복성적우점,위진일보적수도질막단백질조연구제공료가고적시험재료.