CAJ | 학술논문

目的:以虎杖为原料提取的白藜芦醇(Res),再经甲基化反应合成的3,5,4’-三羟基二苯乙烯(3,5,4’-trimethoxystilbene,TMS),对TMS进行结构鉴定和药代动力学测定.检测TMS对肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)的生长抑制和致凋亡作用.方法:用紫外吸收光谱、红外吸收光谱、1H-NMR谱、”C-NMR图谱、质谱检测等方法对TMS进行结构鉴定.测定大鼠口服TMS后的生物利用度,肠道吸收特点,体内组织分布和体内排泄.测定TMS对小鼠的急性毒性.利用大鼠肺动脉制备PASMCs.将细胞分为R组.A组(空白对照组):不加TNF-α,TMS,Res;B组(TNF-α组):100pg/mLTNF-α; C～E组(低～高浓度TMS组):TNF-α (100 pg/mL) +TMS(5,10,20 μmol/L); F～H组(低～高浓度Res组):TNF-α(100 pg/mL)+ Res (50,100,200 μmol/L).MTT法测定TMS对PASMCs增殖的影响.流式Annexin V/PI法测定TMS对PASMCs凋亡的影响.结果:TMS的紫外吸收图谱为λmax(MeOH):318,306.2,217.8nm;红外光谱解析为1R (v)(KBrmax)/cm:2999,2935,2836,1591,1511,1456/cm; 1H-NMB谱解析显示结构含有3个羟基;13C-NMR图谱解析为17个碳信号,并且其结构中含有对称的结构片段.质谱图谱解析为ESI-MS m/z∶ 271[M+H]+,256[M+H-CH3]+,241 [256-CH3]+,相对分子质量为270,推测分子式为C17H18O3,结构中含有甲基.样品元素分析得分子结构式可用C17H18O3表示,因此可确定化合物为反-3,5,4'-三羟基二苯乙烯.TMS绝对生物利用度为45.4％,在小肠上段有较好吸收,通过粪便、胆汁排泄,在各组织中均有分布,最大耐受量(MTD)约5.85 g/kg.TMS干预PASMCs 24 h后经MTT法测定显示对其生长具有显著的抑制作用,其强度呈剂量依赖性改变.A～H组的生长抑制率分别为(4.07±2.12)％,(6.54±4 78)％,(9.35±4.26)％,(16.75±5.34)％,(23.74±7.07)％,(6.78±5.58)％,(8.81±5.16)％,(17.81±6.03)％.流式Annexin V/PI法检测结果显示:TMS干预PASMCs 24 h组细胞凋亡率显著高于TNF-α干预组,且其作用呈剂量依赖性.A～Ⅱ组的细胞凋亡率分别为(2.63±0.74)％,(3.54±0.81)％,(5 77±4.62)％,(11.68±5.35)％,(18.79±4.15)％,(4.11±3.59)％,(6.33±4.8)％,(12.47±5.06)％.结论:TMS的分子式可用C17H18O3表示,结构式为反-3,5,4'-三羟基二苯乙烯.TMS的生物利用度为45％.TMS呈剂量依赖性地抑制PASMCs的增殖并诱导其凋亡. 目的:以虎杖為原料提取的白藜蘆醇(Res),再經甲基化反應閤成的3,5,4’-三羥基二苯乙烯(3,5,4’-trimethoxystilbene,TMS),對TMS進行結構鑒定和藥代動力學測定.檢測TMS對肺動脈平滑肌細胞(PASMCs)的生長抑製和緻凋亡作用.方法:用紫外吸收光譜、紅外吸收光譜、1H-NMR譜、”C-NMR圖譜、質譜檢測等方法對TMS進行結構鑒定.測定大鼠口服TMS後的生物利用度,腸道吸收特點,體內組織分佈和體內排洩.測定TMS對小鼠的急性毒性.利用大鼠肺動脈製備PASMCs.將細胞分為R組.A組(空白對照組):不加TNF-α,TMS,Res;B組(TNF-α組):100pg/mLTNF-α; C～E組(低～高濃度TMS組):TNF-α (100 pg/mL) +TMS(5,10,20 μmol/L); F～H組(低～高濃度Res組):TNF-α(100 pg/mL)+ Res (50,100,200 μmol/L).MTT法測定TMS對PASMCs增殖的影響.流式Annexin V/PI法測定TMS對PASMCs凋亡的影響.結果:TMS的紫外吸收圖譜為λmax(MeOH):318,306.2,217.8nm;紅外光譜解析為1R (v)(KBrmax)/cm:2999,2935,2836,1591,1511,1456/cm; 1H-NMB譜解析顯示結構含有3箇羥基;13C-NMR圖譜解析為17箇碳信號,併且其結構中含有對稱的結構片段.質譜圖譜解析為ESI-MS m/z∶ 271[M+H]+,256[M+H-CH3]+,241 [256-CH3]+,相對分子質量為270,推測分子式為C17H18O3,結構中含有甲基.樣品元素分析得分子結構式可用C17H18O3錶示,因此可確定化閤物為反-3,5,4'-三羥基二苯乙烯.TMS絕對生物利用度為45.4％,在小腸上段有較好吸收,通過糞便、膽汁排洩,在各組織中均有分佈,最大耐受量(MTD)約5.85 g/kg.TMS榦預PASMCs 24 h後經MTT法測定顯示對其生長具有顯著的抑製作用,其彊度呈劑量依賴性改變.A～H組的生長抑製率分彆為(4.07±2.12)％,(6.54±4 78)％,(9.35±4.26)％,(16.75±5.34)％,(23.74±7.07)％,(6.78±5.58)％,(8.81±5.16)％,(17.81±6.03)％.流式Annexin V/PI法檢測結果顯示:TMS榦預PASMCs 24 h組細胞凋亡率顯著高于TNF-α榦預組,且其作用呈劑量依賴性.A～Ⅱ組的細胞凋亡率分彆為(2.63±0.74)％,(3.54±0.81)％,(5 77±4.62)％,(11.68±5.35)％,(18.79±4.15)％,(4.11±3.59)％,(6.33±4.8)％,(12.47±5.06)％.結論:TMS的分子式可用C17H18O3錶示,結構式為反-3,5,4'-三羥基二苯乙烯.TMS的生物利用度為45％.TMS呈劑量依賴性地抑製PASMCs的增殖併誘導其凋亡.
목적:이호장위원료제취적백려호순(Res),재경갑기화반응합성적3,5,4’-삼간기이분을희(3,5,4’-trimethoxystilbene,TMS),대TMS진행결구감정화약대동역학측정.검측TMS대폐동맥평활기세포(PASMCs)적생장억제화치조망작용.방법:용자외흡수광보、홍외흡수광보、1H-NMR보、”C-NMR도보、질보검측등방법대TMS진행결구감정.측정대서구복TMS후적생물이용도,장도흡수특점,체내조직분포화체내배설.측정TMS대소서적급성독성.이용대서폐동맥제비PASMCs.장세포분위R조.A조(공백대조조):불가TNF-α,TMS,Res;B조(TNF-α조):100pg/mLTNF-α; C～E조(저～고농도TMS조):TNF-α (100 pg/mL) +TMS(5,10,20 μmol/L); F～H조(저～고농도Res조):TNF-α(100 pg/mL)+ Res (50,100,200 μmol/L).MTT법측정TMS대PASMCs증식적영향.류식Annexin V/PI법측정TMS대PASMCs조망적영향.결과:TMS적자외흡수도보위λmax(MeOH):318,306.2,217.8nm;홍외광보해석위1R (v)(KBrmax)/cm:2999,2935,2836,1591,1511,1456/cm; 1H-NMB보해석현시결구함유3개간기;13C-NMR도보해석위17개탄신호,병차기결구중함유대칭적결구편단.질보도보해석위ESI-MS m/z∶ 271[M+H]+,256[M+H-CH3]+,241 [256-CH3]+,상대분자질량위270,추측분자식위C17H18O3,결구중함유갑기.양품원소분석득분자결구식가용C17H18O3표시,인차가학정화합물위반-3,5,4'-삼간기이분을희.TMS절대생물이용도위45.4％,재소장상단유교호흡수,통과분편、담즙배설,재각조직중균유분포,최대내수량(MTD)약5.85 g/kg.TMS간예PASMCs 24 h후경MTT법측정현시대기생장구유현저적억제작용,기강도정제량의뢰성개변.A～H조적생장억제솔분별위(4.07±2.12)％,(6.54±4 78)％,(9.35±4.26)％,(16.75±5.34)％,(23.74±7.07)％,(6.78±5.58)％,(8.81±5.16)％,(17.81±6.03)％.류식Annexin V/PI법검측결과현시:TMS간예PASMCs 24 h조세포조망솔현저고우TNF-α간예조,차기작용정제량의뢰성.A～Ⅱ조적세포조망솔분별위(2.63±0.74)％,(3.54±0.81)％,(5 77±4.62)％,(11.68±5.35)％,(18.79±4.15)％,(4.11±3.59)％,(6.33±4.8)％,(12.47±5.06)％.결론:TMS적분자식가용C17H18O3표시,결구식위반-3,5,4'-삼간기이분을희.TMS적생물이용도위45％.TMS정제량의뢰성지억제PASMCs적증식병유도기조망.