肾脏病与透析肾移植杂志
腎髒病與透析腎移植雜誌
신장병여투석신이식잡지
CHINESE JOURNAL OF NEPHROLOGY,DIALYSIS & TRANSPLANTATION
2004年
1期
55-59
,共5页
王仁定%陈江华%李敏伟%吴建永%方廉廉%何强
王仁定%陳江華%李敏偉%吳建永%方廉廉%何彊
왕인정%진강화%리민위%오건영%방렴렴%하강
嵌合体%肾移植%PCR-Flow
嵌閤體%腎移植%PCR-Flow
감합체%신이식%PCR-Flow
目的:建立能定量检测肾移植术后供体来源细胞(嵌合体)的PCR-Flow方法.方法:利用细胞内聚合酶链反应(PCR)结合流式细胞仪、琼脂凝胶电泳、凝胶成像分析、荧光显微镜等技术,用两位人类白细胞DR抗原(HLA-DR)位点不同献血者外周血单核细胞,模拟供受体细胞混合(嵌合体),进行实验可行性和准确性研究,并对实验进行特异性分析.在此基础上对本院1999年1月至2001年12月进行肾移植联合供体骨髓细胞(donorbonemarrow cell,DBMC)输注36例(DBMC组)及未进行骨髓输注的同一供体配对患者26例(配对对照组)移植术后嵌合体进行动态检测.结果:模拟的嵌合体百分比与PCR-Flow检测嵌合体百分比呈直线关系,且方法的敏感性为0.05%,为特异性扩增.DBMC组术后4周和8周嵌合体与配对对照组相比明显增加,分别为(9.20±8.03)%与(1.29±2.05)%(P<0.01),和(7.73±7.35)%与(0.76±1.93)%(P<0.01).但8周以后各个时间点两组之间无统计学差别.结论:PCR-Flow检测嵌合体方法可靠、敏感性和特异性高,是检测外周血中微量嵌合体的新方法.
目的:建立能定量檢測腎移植術後供體來源細胞(嵌閤體)的PCR-Flow方法.方法:利用細胞內聚閤酶鏈反應(PCR)結閤流式細胞儀、瓊脂凝膠電泳、凝膠成像分析、熒光顯微鏡等技術,用兩位人類白細胞DR抗原(HLA-DR)位點不同獻血者外週血單覈細胞,模擬供受體細胞混閤(嵌閤體),進行實驗可行性和準確性研究,併對實驗進行特異性分析.在此基礎上對本院1999年1月至2001年12月進行腎移植聯閤供體骨髓細胞(donorbonemarrow cell,DBMC)輸註36例(DBMC組)及未進行骨髓輸註的同一供體配對患者26例(配對對照組)移植術後嵌閤體進行動態檢測.結果:模擬的嵌閤體百分比與PCR-Flow檢測嵌閤體百分比呈直線關繫,且方法的敏感性為0.05%,為特異性擴增.DBMC組術後4週和8週嵌閤體與配對對照組相比明顯增加,分彆為(9.20±8.03)%與(1.29±2.05)%(P<0.01),和(7.73±7.35)%與(0.76±1.93)%(P<0.01).但8週以後各箇時間點兩組之間無統計學差彆.結論:PCR-Flow檢測嵌閤體方法可靠、敏感性和特異性高,是檢測外週血中微量嵌閤體的新方法.
목적:건립능정량검측신이식술후공체래원세포(감합체)적PCR-Flow방법.방법:이용세포내취합매련반응(PCR)결합류식세포의、경지응효전영、응효성상분석、형광현미경등기술,용량위인류백세포DR항원(HLA-DR)위점불동헌혈자외주혈단핵세포,모의공수체세포혼합(감합체),진행실험가행성화준학성연구,병대실험진행특이성분석.재차기출상대본원1999년1월지2001년12월진행신이식연합공체골수세포(donorbonemarrow cell,DBMC)수주36례(DBMC조)급미진행골수수주적동일공체배대환자26례(배대대조조)이식술후감합체진행동태검측.결과:모의적감합체백분비여PCR-Flow검측감합체백분비정직선관계,차방법적민감성위0.05%,위특이성확증.DBMC조술후4주화8주감합체여배대대조조상비명현증가,분별위(9.20±8.03)%여(1.29±2.05)%(P<0.01),화(7.73±7.35)%여(0.76±1.93)%(P<0.01).단8주이후각개시간점량조지간무통계학차별.결론:PCR-Flow검측감합체방법가고、민감성화특이성고,시검측외주혈중미량감합체적신방법.