中国神经免疫学和神经病学杂志
中國神經免疫學和神經病學雜誌
중국신경면역학화신경병학잡지
CHINESE JOURNAL OF NEUROIMMUNOLOGY AND
2012年
5期
366-370
,共5页
阿尔茨海默病%β淀粉样蛋白%谷胱甘肽过氧化物酶%cAMP反应元件结合蛋白%免疫组织化学
阿爾茨海默病%β澱粉樣蛋白%穀胱甘肽過氧化物酶%cAMP反應元件結閤蛋白%免疫組織化學
아이자해묵병%β정분양단백%곡광감태과양화물매%cAMP반응원건결합단백%면역조직화학
目的 探讨细胞内高表达谷胱甘肽过氧化物酶(GPX1)能否提高阿尔茨海默病(AD)细胞模型中cAMP反应元件结合蛋白(CREB)的磷酸化水平.方法 采用MTT法确定G418的筛选浓度,采用目的质粒与绿色荧光蛋白质粒共转染的方式将GPX1重组质粒和pLNCX空载体质粒转染至PC12细胞,以G418筛选浓度筛选出成功转染进GPX1重组质粒和pLNCX空载体质粒的细胞；采用MTT法确定β淀粉样蛋白(Aβ25-35)的最佳诱导浓度,建立AD细胞模型；以最佳Aβ25-35浓度分别诱导转染GPX1重组质粒组和转染pLNCX空载体质粒组细胞48 h,采用免疫细胞化学方法检测诱导前后各组细胞内P-CREB的水平.结果 在最佳Aβ25-35浓度诱导转染GPX1重组质粒组和转染pLNCX空载体质粒组前,两组细胞内的P-CREB水平无统计学差异(P＞0.05)；诱导48 h后,两组细胞内P-CREB水平均显著降低(P＜0.01),但转染GPX1重组质粒组细胞内的P-CREB水平仍明显高于转染pLNCX空载体质粒组的水平(P＜0.01).结论 Aβ25-35可导致细胞内P-CREB 水平降低,转染GPX1重组质粒可在一定程度上逆转Aβ25-35所致的P-CREB水平降低.
目的 探討細胞內高錶達穀胱甘肽過氧化物酶(GPX1)能否提高阿爾茨海默病(AD)細胞模型中cAMP反應元件結閤蛋白(CREB)的燐痠化水平.方法 採用MTT法確定G418的篩選濃度,採用目的質粒與綠色熒光蛋白質粒共轉染的方式將GPX1重組質粒和pLNCX空載體質粒轉染至PC12細胞,以G418篩選濃度篩選齣成功轉染進GPX1重組質粒和pLNCX空載體質粒的細胞；採用MTT法確定β澱粉樣蛋白(Aβ25-35)的最佳誘導濃度,建立AD細胞模型；以最佳Aβ25-35濃度分彆誘導轉染GPX1重組質粒組和轉染pLNCX空載體質粒組細胞48 h,採用免疫細胞化學方法檢測誘導前後各組細胞內P-CREB的水平.結果 在最佳Aβ25-35濃度誘導轉染GPX1重組質粒組和轉染pLNCX空載體質粒組前,兩組細胞內的P-CREB水平無統計學差異(P＞0.05)；誘導48 h後,兩組細胞內P-CREB水平均顯著降低(P＜0.01),但轉染GPX1重組質粒組細胞內的P-CREB水平仍明顯高于轉染pLNCX空載體質粒組的水平(P＜0.01).結論 Aβ25-35可導緻細胞內P-CREB 水平降低,轉染GPX1重組質粒可在一定程度上逆轉Aβ25-35所緻的P-CREB水平降低.
목적 탐토세포내고표체곡광감태과양화물매(GPX1)능부제고아이자해묵병(AD)세포모형중cAMP반응원건결합단백(CREB)적린산화수평.방법 채용MTT법학정G418적사선농도,채용목적질립여록색형광단백질립공전염적방식장GPX1중조질립화pLNCX공재체질립전염지PC12세포,이G418사선농도사선출성공전염진GPX1중조질립화pLNCX공재체질립적세포；채용MTT법학정β정분양단백(Aβ25-35)적최가유도농도,건립AD세포모형；이최가Aβ25-35농도분별유도전염GPX1중조질립조화전염pLNCX공재체질립조세포48 h,채용면역세포화학방법검측유도전후각조세포내P-CREB적수평.결과 재최가Aβ25-35농도유도전염GPX1중조질립조화전염pLNCX공재체질립조전,량조세포내적P-CREB수평무통계학차이(P＞0.05)；유도48 h후,량조세포내P-CREB수평균현저강저(P＜0.01),단전염GPX1중조질립조세포내적P-CREB수평잉명현고우전염pLNCX공재체질립조적수평(P＜0.01).결론 Aβ25-35가도치세포내P-CREB 수평강저,전염GPX1중조질립가재일정정도상역전Aβ25-35소치적P-CREB수평강저.
