中华眼科杂志
中華眼科雜誌
중화안과잡지
Chinese Journal of Ophthalmology
2007年
2期
134-141
,共8页
杨威%顾国贞%宋鄂%崔治华%董宇%隋东明%马艳玲
楊威%顧國貞%宋鄂%崔治華%董宇%隋東明%馬豔玲
양위%고국정%송악%최치화%동우%수동명%마염령
角膜缘%眼烧伤%烧伤,化学%羊膜%角膜移植
角膜緣%眼燒傷%燒傷,化學%羊膜%角膜移植
각막연%안소상%소상,화학%양막%각막이식
目的 研究人角膜缘上皮细胞的生物学特性,探讨体外培养的人角膜缘上皮细胞移植进行眼表重建的临床应用价值及前景.方法 体外培养人角膜缘上皮细胞,通过免疫荧光染色法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法分析表型,BrdU掺人法检测慢周期(slow-cycling)细胞.建立大鼠角膜碱烧伤模型,随机分为单纯对照组、羊膜移植(AMT)组及羊膜为载体的角膜缘上皮细胞移植(LSAT)组,术后通过裂隙灯显微镜观察、角膜切片HE染色及免疫荧光染色等方法对各组大鼠眼表恢复情况进行评价.结果 培养早期大多数角膜缘上皮细胞p63和K19染色阳性,仅少数细胞K3染色阳性;随培养时间的延长,K3阳性细胞增多,部分细胞同时表达p63和K3.RT-PCR示培养的角膜缘上皮细胞中p63和K12均有阳性表达,而角膜上皮细胞仅表达K12.BrdU掺入法检测到慢周期细胞.动物实验表明,LSAT可以显著减轻角膜病变,使角膜恢复完整性和透明性,眼表评分各项指标与AMT组和对照组比较差异均有统计学意义.LSAT组大鼠角膜切片染色示大部分上皮细胞抗人核和K3染色阳性.结论 体外培养的人角膜缘上皮细胞中p63不仅表达于角膜缘干细胞,在短暂扩充细胞中也有一定量的表达;慢周期细胞的存在证实了培养的角膜缘上皮细胞中角膜缘干细胞的存在,p63和K19阳性、K3阴性的细胞为角膜缘干细胞;羊膜为载体的体外培养的人角膜缘上皮细胞移植可有效重建眼表,具有较高的临床应用价值与发展前景.(中华眼科杂志,2007,43:134-141)
目的 研究人角膜緣上皮細胞的生物學特性,探討體外培養的人角膜緣上皮細胞移植進行眼錶重建的臨床應用價值及前景.方法 體外培養人角膜緣上皮細胞,通過免疫熒光染色法和逆轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR)法分析錶型,BrdU摻人法檢測慢週期(slow-cycling)細胞.建立大鼠角膜堿燒傷模型,隨機分為單純對照組、羊膜移植(AMT)組及羊膜為載體的角膜緣上皮細胞移植(LSAT)組,術後通過裂隙燈顯微鏡觀察、角膜切片HE染色及免疫熒光染色等方法對各組大鼠眼錶恢複情況進行評價.結果 培養早期大多數角膜緣上皮細胞p63和K19染色暘性,僅少數細胞K3染色暘性;隨培養時間的延長,K3暘性細胞增多,部分細胞同時錶達p63和K3.RT-PCR示培養的角膜緣上皮細胞中p63和K12均有暘性錶達,而角膜上皮細胞僅錶達K12.BrdU摻入法檢測到慢週期細胞.動物實驗錶明,LSAT可以顯著減輕角膜病變,使角膜恢複完整性和透明性,眼錶評分各項指標與AMT組和對照組比較差異均有統計學意義.LSAT組大鼠角膜切片染色示大部分上皮細胞抗人覈和K3染色暘性.結論 體外培養的人角膜緣上皮細胞中p63不僅錶達于角膜緣榦細胞,在短暫擴充細胞中也有一定量的錶達;慢週期細胞的存在證實瞭培養的角膜緣上皮細胞中角膜緣榦細胞的存在,p63和K19暘性、K3陰性的細胞為角膜緣榦細胞;羊膜為載體的體外培養的人角膜緣上皮細胞移植可有效重建眼錶,具有較高的臨床應用價值與髮展前景.(中華眼科雜誌,2007,43:134-141)
목적 연구인각막연상피세포적생물학특성,탐토체외배양적인각막연상피세포이식진행안표중건적림상응용개치급전경.방법 체외배양인각막연상피세포,통과면역형광염색법화역전록취합매련반응(RT-PCR)법분석표형,BrdU참인법검측만주기(slow-cycling)세포.건립대서각막감소상모형,수궤분위단순대조조、양막이식(AMT)조급양막위재체적각막연상피세포이식(LSAT)조,술후통과렬극등현미경관찰、각막절편HE염색급면역형광염색등방법대각조대서안표회복정황진행평개.결과 배양조기대다수각막연상피세포p63화K19염색양성,부소수세포K3염색양성;수배양시간적연장,K3양성세포증다,부분세포동시표체p63화K3.RT-PCR시배양적각막연상피세포중p63화K12균유양성표체,이각막상피세포부표체K12.BrdU참입법검측도만주기세포.동물실험표명,LSAT가이현저감경각막병변,사각막회복완정성화투명성,안표평분각항지표여AMT조화대조조비교차이균유통계학의의.LSAT조대서각막절편염색시대부분상피세포항인핵화K3염색양성.결론 체외배양적인각막연상피세포중p63불부표체우각막연간세포,재단잠확충세포중야유일정량적표체;만주기세포적존재증실료배양적각막연상피세포중각막연간세포적존재,p63화K19양성、K3음성적세포위각막연간세포;양막위재체적체외배양적인각막연상피세포이식가유효중건안표,구유교고적림상응용개치여발전전경.(중화안과잡지,2007,43:134-141)
