中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2005年
5期
332-335
,共4页
刘丽玲%王秀荣%陈化兰%邓国华%乔传玲%李呈军
劉麗玲%王秀榮%陳化蘭%鄧國華%喬傳玲%李呈軍
류려령%왕수영%진화란%산국화%교전령%리정군
禽流感病毒%基因%克隆%序列测定
禽流感病毒%基因%剋隆%序列測定
금류감병독%기인%극륭%서렬측정
通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术对禽流感病毒A/Turkey/Wisconsin/1/66(H9N2)的8个基因片段即PA、PB1、PB2、NS、NP、M、HA、NA分别进行扩增,然后将其克隆到PMD18-T载体后进行序列测定和拼接;并将克隆到的8个基因片段与以下毒株各个基因的相应序列进行比较分析:Duck/HongKong/Y280/97(DHKY280/97)、Duck/HongKong/YT439/97(DHKY439/97)、Quail/HongKong/G1/97(QHKG1/97)、A/Chicken/Beijing/1/94(CBJ1/94)、Chicken/HongKong/G9/97(CHKG9/97)、A/Turkey/California1/66(TC/1/66).结果表明:我们克隆到的TW1/66株的8个基因片段均含有相应病毒基因的完整开放阅读框架:TW1/66的各基因与TC/1/66株相应各基因同源性最高(NS基因除外,同源性只有(67.4%).与其它各毒株各基因同源性均较低,但与DHKY439/97各基因同源性高于与DHKY280/97、QHKG1/97、CBJ1/94、CHKG9/97各基因同源性.
通過反轉錄-聚閤酶鏈式反應(RT-PCR)技術對禽流感病毒A/Turkey/Wisconsin/1/66(H9N2)的8箇基因片段即PA、PB1、PB2、NS、NP、M、HA、NA分彆進行擴增,然後將其剋隆到PMD18-T載體後進行序列測定和拼接;併將剋隆到的8箇基因片段與以下毒株各箇基因的相應序列進行比較分析:Duck/HongKong/Y280/97(DHKY280/97)、Duck/HongKong/YT439/97(DHKY439/97)、Quail/HongKong/G1/97(QHKG1/97)、A/Chicken/Beijing/1/94(CBJ1/94)、Chicken/HongKong/G9/97(CHKG9/97)、A/Turkey/California1/66(TC/1/66).結果錶明:我們剋隆到的TW1/66株的8箇基因片段均含有相應病毒基因的完整開放閱讀框架:TW1/66的各基因與TC/1/66株相應各基因同源性最高(NS基因除外,同源性隻有(67.4%).與其它各毒株各基因同源性均較低,但與DHKY439/97各基因同源性高于與DHKY280/97、QHKG1/97、CBJ1/94、CHKG9/97各基因同源性.
통과반전록-취합매련식반응(RT-PCR)기술대금류감병독A/Turkey/Wisconsin/1/66(H9N2)적8개기인편단즉PA、PB1、PB2、NS、NP、M、HA、NA분별진행확증,연후장기극륭도PMD18-T재체후진행서렬측정화병접;병장극륭도적8개기인편단여이하독주각개기인적상응서렬진행비교분석:Duck/HongKong/Y280/97(DHKY280/97)、Duck/HongKong/YT439/97(DHKY439/97)、Quail/HongKong/G1/97(QHKG1/97)、A/Chicken/Beijing/1/94(CBJ1/94)、Chicken/HongKong/G9/97(CHKG9/97)、A/Turkey/California1/66(TC/1/66).결과표명:아문극륭도적TW1/66주적8개기인편단균함유상응병독기인적완정개방열독광가:TW1/66적각기인여TC/1/66주상응각기인동원성최고(NS기인제외,동원성지유(67.4%).여기타각독주각기인동원성균교저,단여DHKY439/97각기인동원성고우여DHKY280/97、QHKG1/97、CBJ1/94、CHKG9/97각기인동원성.