福建医科大学学报
福建醫科大學學報
복건의과대학학보
JOURNAL OF FUJIAN MEDICAL UNIVERSITY
2009年
2期
98-100
,共3页
基因,bcl-2%启动区(遗传学)%流式细胞术%白血病
基因,bcl-2%啟動區(遺傳學)%流式細胞術%白血病
기인,bcl-2%계동구(유전학)%류식세포술%백혈병
目的 应用pEGFP-1质粒构建含有bcl-2启动子(bcl-2P)的载体,转染高表达bcl-2的HL-60细胞和低表达bcl-2的K562细胞,测定绿荧光蛋白在2种细胞中的表达程度,观察特异性启动子能否引导目的基因在靶细胞表达,达到基因定位的目的.方法 克隆bcl-2P,采用pEGFP-1质粒构建含有bcl-2P的载体;应用电击法转染pEGFP-BCL-2P DNA到HL-60和K562细胞并培养;测定EGFP在HL-60细胞和K562细胞中的表达.结果 成功构建含bcl-2P绿荧光病毒载体pEGFP-BCL-2P,绿荧光的表达率在HL-60及K562细胞分别为64.29%及0.5%.表达绿荧光阳性的HL-60细胞在培养30 d后仍有89.6%的细胞表达阳性.结论 绿荧光在HL-60细胞中有较稳定的高表达,而在K562细胞中几乎不表达,说明特异的bcl-2P能引导目的基因在靶细胞表达,可能成为基因定位的一种方法.
目的 應用pEGFP-1質粒構建含有bcl-2啟動子(bcl-2P)的載體,轉染高錶達bcl-2的HL-60細胞和低錶達bcl-2的K562細胞,測定綠熒光蛋白在2種細胞中的錶達程度,觀察特異性啟動子能否引導目的基因在靶細胞錶達,達到基因定位的目的.方法 剋隆bcl-2P,採用pEGFP-1質粒構建含有bcl-2P的載體;應用電擊法轉染pEGFP-BCL-2P DNA到HL-60和K562細胞併培養;測定EGFP在HL-60細胞和K562細胞中的錶達.結果 成功構建含bcl-2P綠熒光病毒載體pEGFP-BCL-2P,綠熒光的錶達率在HL-60及K562細胞分彆為64.29%及0.5%.錶達綠熒光暘性的HL-60細胞在培養30 d後仍有89.6%的細胞錶達暘性.結論 綠熒光在HL-60細胞中有較穩定的高錶達,而在K562細胞中幾乎不錶達,說明特異的bcl-2P能引導目的基因在靶細胞錶達,可能成為基因定位的一種方法.
목적 응용pEGFP-1질립구건함유bcl-2계동자(bcl-2P)적재체,전염고표체bcl-2적HL-60세포화저표체bcl-2적K562세포,측정록형광단백재2충세포중적표체정도,관찰특이성계동자능부인도목적기인재파세포표체,체도기인정위적목적.방법 극륭bcl-2P,채용pEGFP-1질립구건함유bcl-2P적재체;응용전격법전염pEGFP-BCL-2P DNA도HL-60화K562세포병배양;측정EGFP재HL-60세포화K562세포중적표체.결과 성공구건함bcl-2P록형광병독재체pEGFP-BCL-2P,록형광적표체솔재HL-60급K562세포분별위64.29%급0.5%.표체록형광양성적HL-60세포재배양30 d후잉유89.6%적세포표체양성.결론 록형광재HL-60세포중유교은정적고표체,이재K562세포중궤호불표체,설명특이적bcl-2P능인도목적기인재파세포표체,가능성위기인정위적일충방법.
