植物病理学报
植物病理學報
식물병이학보
ACTA PHYTOPATHOLOGICA SINICA
2010年
6期
574-578
,共5页
赵芹%沈文锦%张翼翔%刘福秀%李华平
趙芹%瀋文錦%張翼翔%劉福秀%李華平
조근%침문금%장익상%류복수%리화평
水稻瘤矮病毒%基因沉默抑制子%原核表达%抗血清制备
水稻瘤矮病毒%基因沉默抑製子%原覈錶達%抗血清製備
수도류왜병독%기인침묵억제자%원핵표체%항혈청제비
以采自广东省水稻瘤矮病的典型病株为材料,通过RT-PCR法扩增和克隆了水稻瘤矮病毒(Rice gall dwarf virus,RGDV)Sll组分核苷酸序列全长.序列分析结果表明,RGDV广东分离物Sll(登录号EF532326)核苷酸序列全长1 168 bp,含有一个1 068 bp的开放阅读框,编码一条355个氨基酸的多肽,推测分子量约40 kD,与泰国分离物基因结构基本一致,其核苷酸与氨基酸序列相似性分别为94.3%和98.8%.将广东分离物SII基因克隆至pBV221温敏表达载体上,在大肠杆菌DH5α中实现了高效表达.以诱导蛋白为抗原免疫家兔获得了抗血清.利用ELISA法测定抗血清的效价为1:4 096,Western blot分析结果表明,抗血清能与Sll蛋白发生特异血清学反应.这可为进一步研究Sll蛋白的结构和功能,揭示其抑制基因沉默的作用机制提供参考.
以採自廣東省水稻瘤矮病的典型病株為材料,通過RT-PCR法擴增和剋隆瞭水稻瘤矮病毒(Rice gall dwarf virus,RGDV)Sll組分覈苷痠序列全長.序列分析結果錶明,RGDV廣東分離物Sll(登錄號EF532326)覈苷痠序列全長1 168 bp,含有一箇1 068 bp的開放閱讀框,編碼一條355箇氨基痠的多肽,推測分子量約40 kD,與泰國分離物基因結構基本一緻,其覈苷痠與氨基痠序列相似性分彆為94.3%和98.8%.將廣東分離物SII基因剋隆至pBV221溫敏錶達載體上,在大腸桿菌DH5α中實現瞭高效錶達.以誘導蛋白為抗原免疫傢兔穫得瞭抗血清.利用ELISA法測定抗血清的效價為1:4 096,Western blot分析結果錶明,抗血清能與Sll蛋白髮生特異血清學反應.這可為進一步研究Sll蛋白的結構和功能,揭示其抑製基因沉默的作用機製提供參攷.
이채자광동성수도류왜병적전형병주위재료,통과RT-PCR법확증화극륭료수도류왜병독(Rice gall dwarf virus,RGDV)Sll조분핵감산서렬전장.서렬분석결과표명,RGDV엄동분리물Sll(등록호EF532326)핵감산서렬전장1 168 bp,함유일개1 068 bp적개방열독광,편마일조355개안기산적다태,추측분자량약40 kD,여태국분리물기인결구기본일치,기핵감산여안기산서렬상사성분별위94.3%화98.8%.장엄동분리물SII기인극륭지pBV221온민표체재체상,재대장간균DH5α중실현료고효표체.이유도단백위항원면역가토획득료항혈청.이용ELISA법측정항혈청적효개위1:4 096,Western blot분석결과표명,항혈청능여Sll단백발생특이혈청학반응.저가위진일보연구Sll단백적결구화공능,게시기억제기인침묵적작용궤제제공삼고.
