CAJ | 학술논문

目的探讨结缔组织生长因子(CTGF)在高糖诱导小鼠足细胞nephrin、podocin表达减少中的作用,及针对CTGF基因的siRNA对其影响.方法将体外培养的小鼠足细胞分为6组:(1)正常对照组,1640培养基含D-葡萄糖1 g/L;(2)等渗对照组,1640培养基合D-葡萄糖lg/L,甘露醇3.5 g,L;(3)高糖组,1640培养基含D.葡萄糖4.5 g,L;(4)高糖+空白对照组:细胞转染空白质粒后于舍D-葡萄糖4.5 g/L中的1640培养基中培养;(5)高糖+阴性对照组:细胞转染含无关序列的重组质粒后于含D-葡萄糖4.5 g/L中的1640培养基中培养;(6)高糖+干扰组:细胞转染针对CTGF的siRNA表达质粒后于含D-葡萄糖4.5g/L中的1640培养基中培养.应用Reahime PCR检测nephrin、podocin、CTGFmRNA水平,Western blot检测CTGF,nephrin、podocin蛋白表达水平.结果高糖可诱导CTGF mRNA及蛋白表达增加,下调足细胞的nephrin、podocin mRNA及蛋白水平,而通过特异性siRNA抑制CTGFmRNA表达后,CTGF表达减少,同时伴有细胞nephrin、podocin表达升高.结论 CTGF是高糖诱导小鼠足细胞损伤的重要介质,高糖可通过CTGF诱导nephrin,podocin表达减少.针对CTGF的siRNA能明显改善这种损伤,为DN发病机制的研究提供新的实验依据.
목적 탐토결체조직생장인자(CTGF)재고당유도소서족세포nephrin、podocin표체감소중적작용,급침대CTGF기인적siRNA대기영향.방법 장체외배양적소서족세포분위6조:(1)정상대조조,1640배양기함D-포도당1 g/L;(2)등삼대조조,1640배양기합D-포도당lg/L,감로순3.5 g,L;(3)고당조,1640배양기함D.포도당4.5 g,L;(4)고당+공백대조조:세포전염공백질립후우사D-포도당4.5 g/L중적1640배양기중배양;(5)고당+음성대조조:세포전염함무관서렬적중조질립후우함D-포도당4.5 g/L중적1640배양기중배양;(6)고당+간우조:세포전염침대CTGF적siRNA표체질립후우함D-포도당4.5g/L중적1640배양기중배양.응용Reahime PCR검측nephrin、podocin、CTGFmRNA수평,Western blot검측CTGF,nephrin、podocin단백표체수평.결과 고당가유도CTGF mRNA급단백표체증가,하조족세포적nephrin、podocin mRNA급단백수평,이통과특이성siRNA억제CTGFmRNA표체후,CTGF표체감소,동시반유세포nephrin、podocin표체승고.결론 CTGF시고당유도소서족세포손상적중요개질,고당가통과CTGF유도nephrin,podocin표체감소.침대CTGF적siRNA능명현개선저충손상,위DN발병궤제적연구제공신적실험의거.