CAJ | 학술논문

目的:构建TRAF1基因干扰重组质粒及建立TRAF1基因干扰瞬时转染胃癌细胞模型,然后通过干扰目标胃癌细胞中的TRAF1基因来检测TRAF1对胃癌细胞的生物学功能的影响.方法:首先通过real-time PCR和Western印迹验证TRAF1在胃癌细胞系BGC823,SGC7901,MGC803中的表达,筛选出TRAF1表达量最高的一株细胞作为干扰转染的目标细胞；设计及构建3个TRAF1的shRNA表达载体pLVX-shRNA-TRAF1-shRNA1～3,将其分别转染至目标胃癌细胞系中,应用real-time PCR和Western印迹筛选出干扰效率最强的shRNA,最后通过MTF及流式细胞术检测TRAF1对胃癌细胞凋亡能力的影响,通过Transwell小室迁移实验来检测对其迁移功能的影响.结果:与GES-1比较,TRAF1基因在BGC823,SGC7901,MGC803中的表达均有上调(P＜0.05),其中以BGC823表达最高；3个TRAF1 shRNA对TRAF1基因均有抑制作用,以pLVX-shRNA-TRAF1-shRNA2干扰效果最强；干扰胃癌细胞BGC823 中的TRAF1可使细胞生长活力减弱,凋亡明显增加,但对其迁移功能无明显影响.结论:TRAF1基因在胃癌细胞系BGC823中上调最明显；pLVX-shRNA-TRAF 1-shRNA2可成功干扰BGC823中TRAF1的表达；TRAF1可抑制BGC823细胞的凋亡.
목적:구건TRAF1기인간우중조질립급건립TRAF1기인간우순시전염위암세포모형,연후통과간우목표위암세포중적TRAF1기인래검측TRAF1대위암세포적생물학공능적영향.방법:수선통과real-time PCR화Western인적험증TRAF1재위암세포계BGC823,SGC7901,MGC803중적표체,사선출TRAF1표체량최고적일주세포작위간우전염적목표세포；설계급구건3개TRAF1적shRNA표체재체pLVX-shRNA-TRAF1-shRNA1～3,장기분별전염지목표위암세포계중,응용real-time PCR화Western인적사선출간우효솔최강적shRNA,최후통과MTF급류식세포술검측TRAF1대위암세포조망능력적영향,통과Transwell소실천이실험래검측대기천이공능적영향.결과:여GES-1비교,TRAF1기인재BGC823,SGC7901,MGC803중적표체균유상조(P＜0.05),기중이BGC823표체최고；3개TRAF1 shRNA대TRAF1기인균유억제작용,이pLVX-shRNA-TRAF1-shRNA2간우효과최강；간우위암세포BGC823 중적TRAF1가사세포생장활력감약,조망명현증가,단대기천이공능무명현영향.결론:TRAF1기인재위암세포계BGC823중상조최명현；pLVX-shRNA-TRAF 1-shRNA2가성공간우BGC823중TRAF1적표체；TRAF1가억제BGC823세포적조망.