天津医药
天津醫藥
천진의약
TIANJIN MEDICAL JOURNAL
2012年
8期
803-805,后插2
,共4页
蔡泽园%赵莉莉%张蕊%毛用敏%崔让庄
蔡澤園%趙莉莉%張蕊%毛用敏%崔讓莊
채택완%조리리%장예%모용민%최양장
肝脂酶%启动区(遗传学)%多态现象,遗传%杂合子%纯合子%转录,遗传%基因表达
肝脂酶%啟動區(遺傳學)%多態現象,遺傳%雜閤子%純閤子%轉錄,遺傳%基因錶達
간지매%계동구(유전학)%다태현상,유전%잡합자%순합자%전록,유전%기인표체
目的:探讨同时含肝脂酶(HL)启动子-514 bp和-250 bp多态位点的野生型及变异纯合子型的荧光素酶表达质粒对HL转录活性的影响.方法:PCR法扩增含不同目的基因的DNA片段,将目的基因插入到pUCm-T质粒中,获取含SacⅠ及BglⅡ酶切位点的目的基因,将该基因与含荧光素报告基因的pGL2质粒相连,构建pGL2-HL/-514T+ -250A变异纯合型以及pGL2-HL/-514C+ -250G野生型荧光素酶表达质粒,转染至HepG2细胞内表达,双荧光素酶检测系统检测不同重组质粒荧光素酶报告基因的活性.结果:(1)实验成功构建了同时含HL启动子部位-514/-250位点的野生型和变异纯合型的荧光素酶表达质粒.(2) pGL2-HL/-514T+ -250A变异纯合型的荧光素酶相对表达活性明显低于野生型荧光素酶表达活性(P＜0.01).结论:HL启动子-514及-250位置基因的联合变异可直接影响HL的转录活性.
目的:探討同時含肝脂酶(HL)啟動子-514 bp和-250 bp多態位點的野生型及變異純閤子型的熒光素酶錶達質粒對HL轉錄活性的影響.方法:PCR法擴增含不同目的基因的DNA片段,將目的基因插入到pUCm-T質粒中,穫取含SacⅠ及BglⅡ酶切位點的目的基因,將該基因與含熒光素報告基因的pGL2質粒相連,構建pGL2-HL/-514T+ -250A變異純閤型以及pGL2-HL/-514C+ -250G野生型熒光素酶錶達質粒,轉染至HepG2細胞內錶達,雙熒光素酶檢測繫統檢測不同重組質粒熒光素酶報告基因的活性.結果:(1)實驗成功構建瞭同時含HL啟動子部位-514/-250位點的野生型和變異純閤型的熒光素酶錶達質粒.(2) pGL2-HL/-514T+ -250A變異純閤型的熒光素酶相對錶達活性明顯低于野生型熒光素酶錶達活性(P＜0.01).結論:HL啟動子-514及-250位置基因的聯閤變異可直接影響HL的轉錄活性.
목적:탐토동시함간지매(HL)계동자-514 bp화-250 bp다태위점적야생형급변이순합자형적형광소매표체질립대HL전록활성적영향.방법:PCR법확증함불동목적기인적DNA편단,장목적기인삽입도pUCm-T질립중,획취함SacⅠ급BglⅡ매절위점적목적기인,장해기인여함형광소보고기인적pGL2질립상련,구건pGL2-HL/-514T+ -250A변이순합형이급pGL2-HL/-514C+ -250G야생형형광소매표체질립,전염지HepG2세포내표체,쌍형광소매검측계통검측불동중조질립형광소매보고기인적활성.결과:(1)실험성공구건료동시함HL계동자부위-514/-250위점적야생형화변이순합형적형광소매표체질립.(2) pGL2-HL/-514T+ -250A변이순합형적형광소매상대표체활성명현저우야생형형광소매표체활성(P＜0.01).결론:HL계동자-514급-250위치기인적연합변이가직접영향HL적전록활성.
